核内でmRNAとして識別され、mRNA核外輸送の機能を担うシス配列の探索

寻找在细胞核中被识别为 mRNA 并在 mRNA 核输出中发挥作用的顺式序列

• 批准号: 04J00891
• 负责人: 増山 郁
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J00891/
• 关键词: mRNA; 核外輸送; RNAスプライシング; 輸送因子; アフリカツメガエル; RNAプロセシング; U snRNA

高等真核生物において、核のゲノムにコードされるmRNAの多くは未成熟なmRNA前躯体として転写されるが、核内におけるスプライシングによるイントロンの除去やポリ(A)鎖の付加といった、RNAプロセシング過程を経て成熟mRNAとなり細胞質へ輸送される。近年の研究から、mRNAの核外輸送過程とRNAプロセシング過程が相互に関連していることが明らかになってきている。とりわけスプライシングはmRNA核外輸送に重要な役割を果たすことが知られている。Exonic Splicing Enhancer (ESE)配列はスプライシングを正に制御するシス配列として機能する。しかしESEによるスプライシングの制御がmRNA核外輸送にどのような役割を果たしているかは未知である。そこで本研究ではmRNAの核外輸送におけるESE配列の役割の解明を試みた。ESEを付加した様々なキメラRNAを作成し、アフリカツメガエル卵母細胞核にRNA微量注入の系でRNAの核外輸送を調べた結果、意外なことにESEを含むRNAの核外輸送を阻害しRNAが核内に留められることが明らかになった。この現象の分子機構を解明する目的で次にESEと複合体を形成する因子の探索を試みた。その結果スプライシングを触媒するスプラソソームに含まれるU2 snRNPの構成因子を同定した。さらにU2 snRNAがESEを含むRNAと優先的に複合体形成することを示唆する結果が得られた。イントロンを持つRNAを用いてESEの核外輸送における役割を調べたところ、スプライシングを経たRNAはESEの効果を乗り越え核外へ輸送されることが明らかになった。これらの結果は、ESEがスプライソソームをリクルートすることでRNAの核外輸送を阻害し、さらにスプライシングを促進することで、イントロンが除去された成熟mRNAを選択的に核外へ輸送する役割を担うことを示唆している。

Higher eukaryotes において, nuclear のゲノムにコードされるmRNA の多くはImmature なmRNA precursor body として転WRITE されるが, inside the nucleus におけるスプライといった、RN The process of A-プロセシングを経てmature mRNA and cytoplasm transportされる. In recent years, research has shown that the extranuclear transport process of mRNA and the process of extranuclear transport of mRNA are closely related to each other. It is important for extranuclear transport of mRNA to be carried out. Exonic Splicing Enhancer (ESE) is equipped with the same function as the original one.しかしESEによるスプライシングのcontrolがmRNA extranuclear transportにどのようなServant cut を Fruit たしているかはUnknown である. This study is based on the analysis of the extranuclear transport of mRNA and the ESE alignment. ESE is a system of RNA microinjection and RNA microinjection into the oocyte nucleus. The result of sending the tune is unexpected, and the unexpected result is that the RNA is transported outside the nucleus and the RNA is transported outside the nucleus.このphenomenonのmolecular structureをexplanationするpurposeでtimesにESEとcomplexをformationするfactorのexplorationみた.そのRESULTS スプライシングをcatalyst するスプラソソームにcontaining まれるU2 snRNPのConstituting factor を同定した.さらにU2 snRNAがESEをcontaining むRNAと preferential に complex formation することをshows the result of がgetられた.イントロンをholds つRNAを Uses いてESEの extranuclear transport における丫 Cuts を Adjusts べたところ、スプライシングを経たRNAはESEの Effect をride り日え外へ Transportation されることが明らかになった.これらのRESULTは、ESEがスプライソソームをリクルートすることでRNA's extranuclear transport is blocked, さらにスプライシングを promotes することで, イントロンが removes the された mature mRNA を extra-nuclear transport and する伋 Cut the dan う こ と を Show 唆 し て い る.

项目成果

RNAの輸送・局在

RNA运输/定位

• 发表时间: 2004
• 期刊: ゲノム医学 4
• 作者: Masaki;M.;et al.;石川裕章;Kaoru Masuyama;Kaoru Masuyama;増山 郁
• 通讯作者: 増山 郁

RNA length defines RNA export pathway

• DOI: 10.1101/gad.1216204
• 发表时间: 2004-09-01
• 期刊: GENES & DEVELOPMENT
• 影响因子: 10.5
• 作者: Masuyama, K;Taniguchi, I;Ohno, M
• 通讯作者: Ohno, M

RNAの核外輸送と運命

RNA输出和命运

• 发表时间: 2004
• 期刊: 躍進するRNA研究 実験医学増刊号 22・17
• 作者: Masaki;M.;et al.;石川裕章;Kaoru Masuyama;Kaoru Masuyama;増山 郁;増山 郁
• 通讯作者: 増山 郁

SR proteins preferentially associate with mRNAs in the nucleus and facilitate their export to the cytoplasm

• DOI: 10.1111/j.1365-2443.2004.00774.x
• 发表时间: 2004-10-01
• 期刊: GENES TO CELLS
• 影响因子: 2.1
• 作者: Masuyama, K;Taniguchi, I;Ohno, M
• 通讯作者: Ohno, M