病的心筋細胞におけるカルセクエストリン・カルレチクリンの変化

病理心肌细胞钙铁蛋白和钙网蛋白的变化

• 批准号: 05770147
• 负责人: 吉田 恭子
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770147/
• 关键词: カルセクエストリン; カルレチクリン; 心筋; 筋小胞体

Calsequestrin(CS)はウサギ骨格筋,Calreticulin(CR)は牛肝臓から精製し,それぞれをウサギに免疫し抗体を作成した。鶏胎児培養骨格筋を用い,蛍光抗体法及びWestern blottingにより筋細胞では分化に伴いCa貯蔵蛋白がCRからCSにおき変わることを明かにした。次に正常成熟ラット心筋凍結切片,培養心筋,人心筋組織での心疾患生検21例でCS,CRの存在様式について検討を行なった.CSは正常ラットおよび人心組織では筋原線維のZ帯付近に規則的な縞状構造として存在し,CRはほとんど認められなかった.培養心筋では,CS陽性SRは,筋原線維と強い親和性を示しながらダイナミックに構成され、培養液にnocodazoleを加え微小管を脱重合することにより、この過程が微小管に依存することが明かになった.正常成熟心筋には認められなかったCRは,長期培養に伴い脱分化細胞で,核周囲に非筋細胞のER様の網状構造として認められた.さらに、拡張型心筋症など心疾患生検組織で,CSの膜直下の異常集積像や,正常では見られないCRの発現が見られた.以上よりSRは動的な構造であり,病的状態で容易に構造変化を生じうることが示された.また,脱分化した培養心筋や心疾患時に見られたCRの発現は,ミオシン重鎖などで報告されているような病的心筋での一種の胎児型遺伝子の再発現と考えられる。逆にこのようなSRの構造変化やCa貯蔵蛋白の変化が、最近注目されている心疾患時の筋小胞体の機能不全の一因となっている可能性も示唆された。

从兔子骨骼肌中纯化Calsequestrin（CS），并从牛肝脏中纯化钙网蛋白（CR），并用兔子免疫以产生抗体。使用鸡胎儿骨骼肌培养，我们揭示了CA储存蛋白从CR从CR变为CS，通过免疫细胞在肌肉细胞中分化。接下来，我们研究了21例心肌冷冻，培养的心肌和人体心肌组织的CS和CR的存在模式。在正常和人类的心肌组织中，CS作为肌原纤维Z带附近的常规条纹状结构存在，几乎没有观察到Cr。在培养的心肌中，CS阳性SR由与肌原纤维的强亲和力动态构建，并通过在培养基中添加诺科唑，揭示了此过程取决于微管。在正常和成熟的心肌中，此过程取决于微管。在正常和成熟的心肌中，CS阳性SR由与肌原纤维的强亲和力动态构建。通过在培养基中添加诺科唑，可以发现该过程取决于微管。在正常和成熟的心肌中，发现该过程取决于微管。在去分化的细胞中发现了未观察到的CR，并发现在去分化细胞中围绕核周网周围是ER样网络。此外，在心脏病活检组织（如扩张的心肌病）等心脏病活检组织中发现了直接在CS膜下方的异常积累图像，并且在正常情况下未见的CR表达。这些结果表明，SR是动态结构，可以轻松地在病理条件下发生结构变化。此外，如肌球蛋白重链报道，在去分化的培养心肌和心脏病中看到的CRs的表达被认为是病理心肌中一种胎儿基因的重新表达。相反，也有人提出，在心脏病期间，SR和CA储存蛋白变化的这些结构变化可能会导致肌浆网络功能障碍，这最近引起了人们的注意。

项目成果

T.Yoshida,et al.: "Association of Cytoplasmic Dynein with Microtubular Manchette in Rat Spermatids." J.Cell Sci.(in press). (1994)

T.Yoshida 等人：“大鼠精子细胞中细胞质动力蛋白与微管 Manchette 的关联”。

K.Imanaka-Yoshida,et al.: "The Cardiomyopathic Hearts(eds:M.Nagano,N.Takeda,N.S.Dhalla),pp245-255" Vinculin containing costameres:parts of contraction forces transmitting sites of cardiomyocytes., 464 (1993)

K.Imanaka-Yoshida 等人：“心肌病心脏（编：M.Nagano、N.Takeda、N.S.Dhalla），第 245-255 页”含有肋节的粘蛋白：心肌细胞收缩力传递部位的部分。，464（1993 年）