尿細管上皮細胞におけるMK遺伝子の役割とその臨床応用に関する研究

MK基因在肾小管上皮细胞中的作用及其临床应用研究

• 批准号: 05770835
• 负责人: 叶澤 孝一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Saitama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770835/
• 关键词: MK遺伝子; 尿細管上皮細胞; 急性腎不全model

1.150〜250gの雄WisterおよびSDラットを用いて、30分間の腎動脈閉塞および50%glycerol 0.1ml/gBWの下腿筋肉内注射により急性腎不全modelを、5/6腎摘出により代償性肥大腎modelを作成した。急性腎不全modelでは6時間後、1日後、3日後、7日後に、代償性肥大腎modelでは10〜12週後に、腎組織をDEPC treated PBSで潅流した後に採取し、total RNAの抽出はacid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform法およびRPA RNA isolationkitで行った。尿細管上皮の再生・増殖過程におけるMK遺伝子の発現をnorthern blot法で観察したが、いずれのmodelにおいてもマウスMK遺伝子の発現はhouse keeping geneとして用いたEF1-alphaの発現に比べ非常に弱く、発現の強弱を検討するに至らなかった。急性腎不全modelにおいて、組織学的検索ではS2〜S3の部位の尿細管上皮の壊死・再生が観察されており、ラット尿細管上皮の再生過程においてはマウスMK遺伝子の関与は弱いと考えられた。2.最近の知見では、マウスMK遺伝子がヒトの組織にcross reactするためにヒト正常組織や癌組織に対するマウスMK遺伝子を用いた研究がなされつつあるが、これを確認するためにhuman tumor cell lineにおいてMK遺伝子の発現が認められるかどうかをnorthern blot法で検討した。この結果、G-401(Wilms'tumor),COLO201(coloncancer)で特に強い発現を認めたのを始め、ITO-II(testicular tumor),T24(urinary bladder tumor),HepG2(hepatoma)でもやや強い発現が認められた。以上の結果を踏まえて、今後腎癌の早期診断などへの臨床応用を検討して行きたい。

1.150 ~ 250g of male Wister and SD were injected into the muscle of the lower leg for 30 minutes. Acute renal insufficiency model and 5/6 kidney extraction model were established. Acute renal insufficiency model 6 days later, 1 day later, 3 days later, 7 days later, compensatory hypertrophic kidney model 10 ~ 12 weeks later, kidney tissue treated with DEPC PBS was taken later, total RNA was extracted from acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform method and RPA RNA isolation kit. The development of MK gene in the regeneration and proliferation of urine tubule epithelium was detected by northern blot. The development of MK gene in the model was very weak compared with that in the EF1-alpha. Acute renal insufficiency model, histological examination of S2 ~ S3 site of urinary tubule epithelium regeneration, observation of the process of urinary tubule epithelium regeneration, and the relationship between MK gene and weak middle examination. 2. Recent knowledge on the development of MK gene in human tumor cell lines has been investigated by northern blot analysis. G-401(Wilms'tumor),COLO201(colon cancer), ITO-II(testicular tumor),T24(urinary bladder tumor),HepG2(hepatoma), etc. These results are helpful for early diagnosis and clinical evaluation of renal cell carcinoma.