悪性脳腫瘍浸潤リンパ球に於けるT細胞抗原レセプターの分子遺伝子学的解析

恶性脑肿瘤淋巴细胞浸润T细胞抗原受体的分子遗传学分析

• 批准号: 05857143
• 负责人: 江波戸 通昌
• 金额: $ 0.45万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05857143/
• 关键词: T細胞抗原レセプター; 腫瘍浸潤リンパ球; 悪性グリオーマ; 遺伝子治療

1)グリオーマの手術標本からT細胞クローンを確立することに関しては、キラー活性などの機能解析に必要な数までのT細胞の増殖が得られていない。2)悪性脳腫瘍浸潤リンパ球に於けるT細胞抗原レセプターa,bk鎖のレパートリー解析。グリオーマの手術標本よりRT-PCR法、Southernblottingを用いて行った。Valphaで18、Vbetaで22種類のレパートリーの中で制限された(2-8種)もののみ発現するrestrectedusageと特定の物が優位に発現するpredominantusageが認められた。12例中predominantusageとしては、alpha鎖ではValpha7とValpha13が6例に、beta鎖ではVbeta13.1が9例に発現した。3腫瘍浸潤T細胞抗原レセプターの遺伝子構造(塩基配列)の検討。PCRで作成したTCRのDNAをBluescriptをvecterとし、TG1をcompitentcellとしてtransformationを行い、dideoxy法にてSequencingを施行した。7例中のVbeta13.1のV-D-J-Cの塩基配列を求めた。個々の症例ごとの、また各症例に渡る共通の遺伝子配列が認められた。これに対して末梢血リンパ球(PBL)ではVbeta13.1を有するTCRのV-D-J-Cの塩基配列はrandomeで、TILとは異なったパターンを示した。比較のためにTILで発現頻度の低かったVbeta3,Vbeta5.1についても同様に塩基配列を求めたが、塩基配列は、randomedであった。Valpha7を持つT cellのsequenceingでは、TILではVbeta13.1で認められたような各症例に渡る共通配列は認められなかったが、個々の症例ごとに共通の配列を持つTILのclonalityがより明かとなり、Vbeta13.1で認められた共通配列の存在からT細胞抗原レセプターからみた悪性グリオーマにおける共通な腫瘍関連抗源の存在の可能性が示唆された。

1) The number of T cell proliferation necessary for the functional analysis of T cell activity is determined. 2) Analysis of T cell antigens in the invasion of malignant tumors. RT-PCR, Southernblotting and other methods are used to detect and detect the presence of DNA. Valpha 18, Vbeta 22 kinds of restrected usage and predominantusage of restrected usage and predominantusage of restrected usage of restrected usage and predominantusage of restrected usage of restrected usage and predominantusage of restrected usage and redominantusage of redominantusage. In 12 cases, predominantuse was found in 6 cases, alpha lock in 7 cases, beta lock in 9 cases. 3. A study on the molecular structure of tumor infiltrating T cell antigen. PCR is performed by TCR DNA vecter, TG1 compentcell and transformation, and by dimethoxy Sequencing. Vbeta13.1 and V-D-J-C in 7 cases. The common genetic arrangement of each disease is recognized. In contrast, the V-D-J-C base arrangement of the TCR with Vbeta13.1 in the peripheral blood lymphocyte (PBL) is randome, and the TIL is different. Compare the frequency of occurrence of the two groups and find out if they are arranged randomly. Valpha7: T cell sequencing: Vbeta13.1: Common alignment: T cell antigen: Vbeta13.1: Common alignment: Vbeta13.1

项目成果

江波戸通昌、新田泰三、八木田秀夫、佐藤潔、奥村康: "悪性グリオーマ浸潤リンパ球T細胞レセプターの分子生物学的分析" 神経免疫研究. 5. 265-269 (1993)

Michimasa Ebato、Taizo Nitta、Hideo Yagita、Kiyoshi Sato、Yasushi Okumura：“恶性胶质瘤浸润淋巴细胞中 T 细胞受体的分子生物学分析”神经免疫学研究 5. 265-269 (1993)。

Ebato M,Nitta T,Yagita H,Sato K and Okmura K: "Skewed Distribution of TCR Va-7 bearing T Cells within Tumor-infiltrating Lymphocyte of HLA-A-24(9)-positive Patients with Malignant Glioma" Immunology Letters. 39. 53-64 (1994)

Ebato M、Nitta T、Yagita H、Sato K 和 Okmura K：“HLA-A-24(9) 阳性恶性胶质瘤患者的肿瘤浸润淋巴细胞内携带 TCR Va-7 的 T 细胞的偏斜分布”免疫学快报。