フェニルケトン尿症の新しいスクリーニング法の開発

开发苯丙酮尿症新筛查方法

• 批准号: 06556017
• 负责人: 浅野 泰久
• 金额: $ 4.93万
• 依托单位: Toyama Prefectural University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 1995
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06556017/
• 关键词: フェニルアラニン脱水素酵素; フェニルケトン尿症; 酵素定量法

(1)酵素の安定化:安定化剤としてグリセロースが優れている。SporosarcinaやB.badiusのフェニルアラニン脱水素酵素はB.sphaericusのそれより、比較的基質特異性が低く、フェニルアラニンの定量に向いている。(2)酵素的定量法の開発:グリシン-KCl-KOH緩衝液(pH10.4)100μmol、NAD+2.5μmol、ヒドラジン・1H_201%(v/v)、L-フェニルアラニン脱水素酵素(Sporosarcina ureaeあるいはBacillus badiusよりの均一精製酵素)0.6単位、及びL-フェニルアラニン0〜0.1μmolを含む1.0mlの反応液を25℃で10分間反応し、340nmにおける吸光度を読み取った。前記反応組成から、L-フェニルアラニン脱水素酵素を除いたものを対照とした。この結果より検量線を作成したところ直線が得られた。この検量線は、L-フェニルアラニンが1000%脱水素され、NADAが等量生成した事を示し、本酵素を用いる定量が可能であることを示している。(3)フェニルケトン尿症のマススクリーニング法の開発:フェナジンメトサルフェートを用いる比色法を検討した。(4)遺伝子のクローニングと一次構造の解明:Sporosarcinaの本酵素遺伝子をクローニングし、B.badiusについては塩基配列を解明した。

(1) enzyme stabilization: tranquilization. Sporosarcina, B.badius, B.sphaericus, dehydrase, dehydrase. (2) the quantitative method of enzyme: 100 μ mol of pH10.4, 2.5 μ mol of NAD+, 1 H _ 201% (v

项目成果

浅野泰久: "生物工学と農芸科学" 日本農芸科学会誌. 68. 1416-1417 (1994)

浅野康久：《生物技术与农业科学》日本农业学会杂志 68. 1416-1417 (1994)。

浅野泰久: "土中の微生物に有用物質を合成させる" 富山の科学技術. 118-119 (1994)

浅野泰久：“土壤中的微生物合成有用物质”富山科学技术118-119（1994）。

浅野泰久: "生物の力を活用する" 富山の科学技術. 12-17 (1994)

Yasuhisa Asano：“利用生物的力量”《富山科学与技术》12-17 (1994)。

黄新立、浅野泰久: "新しいフェニルアラニン脱水素酵素の開発" 富山県立大学紀要. 4. 211-215 (1994)

Xinli Huang、Yasuhisa Asano：“新型苯丙氨酸脱氢酶的开发”富山大学通报，4. 211-215 (1994)。