肝におけるアポBの分泌調節機序・HepG2細胞におけるアポB分解酵素の分離、精製

肝脏apoB分泌的调控机制/HepG2细胞apoB降解酶的分离纯化

• 批准号: 06770816
• 负责人: 古川 誠一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770816/
• 关键词: HepG2 細胞; トリグリセライド; アポB

Eicosapentaenoic acid(EPA)はオレイン酸(OA)と同様にHepG2細胞でapoB分泌を増加させる機序を解明し、また、漢方薬である大柴胡湯、柴胡加竜骨牡蠣湯のin vivoで見られる抗脂血作用をHepG2細胞を用いて検討した。細胞内のTG、CEの合成はcontrol(C),0.4mM、0.8mMのOAまたはEPAの各溶液あるいは、0.5から5.0mg/mlの濃度の大柴胡湯(TJ-8)、柴胡加竜骨牡蠣湯(TJ-12)の溶液を作り、2ないし24時間培養し脂質を測定した。ApoBの分泌は免疫沈降法およびELISA法を用いた。細胞内のTGの合成はCに比べOAとEPAで5倍に増加した。細胞内のCE合成は、OAではCと同様だが、EPAはCに比べ約50%有意に低下させた。TJ-8、TJ-12の細胞内の脂質の合成は0.5mg/mlの濃度で各々Cの約50%に低下した。ApoBの分泌はOAとEPAともCに比べ約3倍増加した。TJ-8、TJ-12のapoBの分泌は両者とも2.0mg/mlの濃度ではCに比べ有意差はなかったが、5.0mg/mlの濃度で有意に抑制した。Pulsechase実験ではapoBの合成量はC,OA,EPAとも有意差はなかったが、細胞内分解は有意に抑制された。OAとEPAはCに比べ細胞内のTG生合成を増大させたが、EPAは細胞内CEの生合成を減少させた。OAとEPAともapoBの細胞内分解を抑制することによりapoBの分泌を亢進させた。細胞内のTG合成亢進はapoBの分泌促進に重要であり、CEはapoBの分泌調節に関与していないことが示唆された。一方、TJ-8、TJ-12は低濃度においてもTG、CEの合成を抑制したが、apoBの分泌を抑制するには、より高濃度でTJ-8、TJ-12を添加する必要があることが判明した。

Eicosapentaenoic acid (EPA) は オ レ イ ン acid (OA) with others と に で HepG2 cell secretion of apoB を raised plus さ せ る machine sequence を interpret し, ま た, Chinese prescription 薬 で あ る big radix bupleuri, radix bupleuri add 竜 bone oyster soup soup の in vivoで see られる antilipophilic effect をHepG2 cells を use て検 て検 to deal with た た. Intracellular の TG, CE の synthetic は control (C), 0.4 mM and 0.8 mM の OA ま た は EPA の each solution あ る い は, 0.5 か ら concentration of 5.0 mg/ml の の major bupleurum decoction (TJ - 8) and radix bupleuri 竜 bone oyster soup (TJ - 12) の solution を り, 2 な い し 24 time cultivating し lipid を し Youdaoplaceholder0. ApoB secretion <s:1> immunoprecipitation method およびELISA method を use た た. The intracellular <s:1> TG <e:1> synthesis of <s:1> Cに is five times に that of べOAとEPAで and に increases た た. The intracellular synthesis of <s:1> CE と, OAで, と Cと is the same as だが, and EPA <s:1> Cに に is approximately 50% lower than べ and intentionally に lower させた. In TJ-8 and TJ-12 <s:1> cells, the synthesis of <s:1> lipids <e:1> is <s:1> 0.5mg/ml <e:1>, with a で concentration of 々C <e:1> of approximately 50% each and a に low <s:1> た. ApoB secretion と OAとEPAと と Cに increased by about three times べ た. TJ - 8, TJ - 12 の apoB の secretion は struck the と も concentration of 2.0 mg/ml の で は C に worse than べ intentionally は な か っ た が, concentration of 5.0 mg/ml の で intentionally に inhibit し た. Pulsechase be 験 で は apoB の synthetic quantity は C, OA, EPA と も deliberately bad は な か っ た が, cell decomposition は intentionally に inhibit さ れ た. OAとEPA に Cに increased を TG biosynthesis させたが in べ cells and decreased を CE <s:1> biosynthesis in EPA cells compared with べ cells. OAとEPAと と apoB <s:1> intracellular decomposition を inhibition する <s:1> とによ させた apoB <s:1> secretion を hyperactivity させた. Intracellular TG の synthetic hyperthyroidism は apoB の secretion in promoting に で あ り, CE は apoB の secretion regulation に masato and し て い な い こ と が in stopping さ れ た. Side, TJ - 8, TJ - 12 は low concentration に お い て も TG, CE の synthetic を suppression し た が, apoB を の secretion inhibition す る に は, よ り high-concentration で TJ - 8, TJ - 12 を add す る necessary が あ る こ と が.at し た.

项目成果

古川誠一,平野勉,永野聖司: "大柴胡湯,柴胡加竜骨牡蠣湯のヒト肝培養細胞(HepG2細胞)における抗脂血作用" 和漢医薬学会誌. 11巻3号(in press). (1994)

Seiichi Furukawa、Tsutomu Hirano、Seiji Nagano：“Dasaikoto 和 Saikokaryukotsukakito 对培养的人肝细胞（HepG2 细胞）的抗脂血症作用”日本中华医学会杂志第 11 卷，第 3 期（出版中）。

M.Kurokawa,T.Hirano,S.Furukawa,S.Nagano,M.Adachi: "Simular to clcic acid,eicosapenfaenooc acid stimulates apolipoprotein B secretion loy inhibiting its intraullular digralation in HepG2 clles." Atherosclcrosis. (in press). (1994)

M.Kurokawa、T.Hirano、S.Furukawa、S.Nagano、M.Adachi：“与氯酸类似，二十碳五烯酸可刺激载脂蛋白 B 分泌，并抑制其在 HepG2 细胞中的胞内二聚。”