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脊損ラット膀胱平滑筋の自律神経受容体における細胞内情報伝達機構に関する研究

脊髓损伤大鼠膀胱平滑肌自主神经受体细胞内信息传递机制研究

基本信息

批准号：
06771280
负责人：
三股浩光
金额：
$ 0.58万
依托单位：
大分医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771280/
关键词：
膀胱平滑筋ムスカリン受容体イノシトールリン脂質

项目摘要

〈目的〉ラット膀胱平滑筋のムスカリン受容体刺激によるイノシトールリン脂質系の情報伝達機構について検討した.〈方法〉10週齢のSprague-Dawleyラットの膀胱平滑筋を細切し,Krebs-Hansleit液中でインキュベートして,carbachol刺激を行った.20%perchloric acidで反応を止め,除蛋白後にIP_3を牛副腎のbinding proteinを用いて[^3H]IP_3との競合法で測定した.各種ムスカリン受容体subtypeのantagonistの影響については,膀胱平滑筋細片を[^3H]myo-inositolと3時間インキュベートし,洗浄後に10mMLiCl存在下でcarbachol刺激を行った.chloroform/methanol法で反応を止め,Dowex AG1カラムでtotal IPを抽出して液体シンチレーションカウンターで測定した.〈結果〉1)IP_3はcarbachol刺激で約20秒後に最高値に達して30秒後には基礎値に戻った.2)carbacholに対するEC_<50>は約5mMであった.3)M1 receptorのantagonistであるPirenzepineでは10^<-5>M以上の高濃度ではじめてIP_3産生が抑制され,M2 receptor antagonistのMethoctramineでは10^<-4>Mの高濃度でも抑制はみられなかった.AtropineとM3 receptor antagonistである4-DAMPでは10^<-7>Mの低濃度でIP_3産生が完全に抑制された.Atropine,4-DAMPおよびPirenzepineのIC_<50>はそれぞれ1.5x10^<-8>M,2.5x10^<-8>Mおよび7.2x10^<-6>Mであった.〈考察〉平滑筋細胞では受容体刺激によってまずIP_3が産生され,ついで細胞内Ca濃度が上昇して収縮応答がおこるとされている.ラット膀胱平滑筋ではM3 receptorがIP_3産生に関与して収縮を惹起するものと考えられたが,IP_3は30秒以内に刺激前値に戻るため、収縮の持続相には関与しないものと考えられた.

Objective: To investigate the information transmission mechanism of lipid system in bladder smooth muscle tissue. <Method> The smooth muscle of Sprague-Dawley bladder at 10 weeks old was cut into fine pieces,Krebs-Hansleit solution was used to stimulate the bladder with carbachol. 20% perchloric acid was used to inhibit IP_3 binding protein. IP_3 binding protein was determined by competitive method. The effects of various receptor subtypes and antagonists on bladder smooth muscle cells were determined by [^3H]myo-inositol and 3 time intervals after washing.Chloroform/methanol method was used to determine the total IP of Dowex AG1. <Results> 1)IP_3 reached its highest value after carbachol stimulation for about 20 seconds, and then reached its basal value after 30 seconds. 2)carbachol responded to EC_<50>about 5mM. 3)M1 receptor responded to its antagonist<-5>. High concentrations above 0 ^ M inhibit IP_3 production. M2 receptor antagonist of Methoctramine 10 ^<-4>M.Atropine M3 receptor antagonist 4-DAMP 10 <-7>^Low concentrations of M completely inhibit IP_3 production. Atropine, 4-DAMP and Pirenzepine IC_s are <50>1.5x10 ^<-8>M, 2.5x10 ^<-8>M and 7.2x10 ^<-6>M respectively. In smooth muscle cells, IP3 was produced by the stimulation of the host, and the intracellular Ca concentration was increased. The M3 receptor in bladder smooth muscle is related to IP3 production and contraction.