ラット膀胱平滑筋のムスカリン受容体における細胞内情報伝達機構に関する研究

大鼠膀胱平滑肌毒蕈碱受体细胞内信号转导机制的研究

• 批准号: 07771312
• 负责人: 三股 浩光
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: 大分医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771312/
• 关键词: rat; bladder; smooth muscle; arachidonic acid; phospholipid; muscarinic receptor; prostaglandine

[目的]膀胱平滑筋のムスカリン受容体刺激によってさまざま細胞応答がおこるが,その一つとしてプロスタグランジンが放出されることが報告されている。今回私はその前段階のアラキドン酸の放出機序について検討した。[方法]10週令のSprague-Dawley系雄ラットを断頭屠殺して膀胱を摘出し,平滑筋層を1mm^3大に細切する。膀胱平滑筋細片を95%O_2/5%CO_2で飽和したKrebs-Hansleit液中で[^3H]-アラキドン酸と一定時間インキュベートする。その際アラキドン酸がプロスタグランジンに変換されないようあらかじめ阻害剤(インドメタシン)を加えておく。膀胱平滑筋細片をKrebs-Hansleit液で洗浄後に,カルバコールで刺激しする。その後に2mlのクロロホルム/メタノール(1:2)を加えて反応を止め、Bligh-Dyer法で総脂質を抽出する。ついで総脂質をシリカゲルプレートを用いて薄相クロマトグラフィーで展開する。オートラジオグラフィーで各分画を検出し、それらを液体シンチレーションカウンターで放射活性を測定する。またAtropineで前処理した膀胱平滑筋を用いて、アラキドン酸放出にムスカリン受容体が関与するかどうかを検討する。[結果・考察]膀胱平滑筋における[^3H]-アラキドン酸の摂取は30分まで経時的に増加し,大部分はリン脂質分画に取り込まれていた。10μMのカルバコール刺激によって遊離[^3H]-アラキドン酸が放出され,これは1mMのAtropineによって完全に抑制された。膀胱平滑筋はムスカリン受容体刺激によって収縮するが,リン脂質からのアラキドン酸放出とその代謝が収縮の維持に関与している可能性が示唆された。

[Objective] Bladder smooth muscle tissue is stimulated by volume, and the cellular response is reported. Now we are back to the previous stage of the acid release process. [Methods] Sprague-Dawley male was decapitated at 10 weeks of age, and the bladder was removed, and the smooth muscle layer was cut to 1 mm^3 in size. Bladder smooth muscle thin slice 95%O_2/5%CO_2 saturation Krebs-Hansleit solution [^3H]-free acid for a certain time All kinds of drugs are used in the treatment of diseases. Bladder smooth muscle thin piece Krebs-Hansleit solution after washing, all kinds of stimulation After the addition of 2ml of the mixture/mixture (1:2), the Bligh-Dyer method was used to extract lipids. In the middle of the game, the game is played. The radioactivity of each component was measured. Atropine pretreatment, bladder smooth muscle use, release of acid, and receptor development [Results·Investigation] Bladder smooth muscle [^3H]-free acid was increased by 30 minutes, and most lipid fractions were increased by 30 minutes. The release of free [^3H]-amino-acid was completely inhibited by 10μM Atropine. Bladder smooth muscle is stimulated by the receptor and the possibility of lipid metabolism and maintenance of contraction is indicated.

项目成果

Hiromitsu Mimata,et al.: "Muscarinic receptor-coupled phosphatidylinositol hydrolysis in rat bladder smooth muscle" International Continence Society 25th Annual Meeting Abstracts. 25. 81-82 (1995)

Hiromitsu Mimata 等人：“大鼠膀胱平滑肌中毒蕈碱受体偶联的磷脂酰肌醇水解”国际节制协会第 25 届年会摘要。

H.Mimata,et al.: "Enhancement of muscarinic receptor-coupled phosphatidyl inositol hydrolysis in diabetic bladder" Molecular Cellular Biochemistry. 152. 71-76 (1995)

H.Mimata 等人：“糖尿病膀胱中毒蕈碱受体偶联磷脂酰肌醇水解的增强”分子细胞生物化学。