頭頸部癌の温熱感受性試験に関する研究

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1.温熱処理後の細胞内ATP量の経時的変化についての検討in vitroで継代されたヒト咽頭癌由来細胞(KBcell line)を、1x10^5個/Flask に調整し、恒温漕内で加熱した。温度設定は43℃1hrとし、温熱処理後の細胞内ATP量をルシフィラーゼを用いたバイオルミネッセンス法にて経時的に測定した。こうして得られたATP量による増殖曲線を、温熱未処理群それと比較することによりgrowth delay timeを求めたところ、温熱処理群は処理後12〜24hrで再増殖した。よって温熱処理による細胞致死効果の判定には、処理後24hr以降でのコントロールにたいする相対ATP量を測定すれば良いことが分かった。2.コロニー法とATP法による細胞温熱感受性の比較検討1)種々あの加熱温度による温熱感受性の比較検討KB cellを用い、42,43,44℃加温に対する生存率をコロニー法と、また温熱処理によりコントロールに対して減少した相対的ATP量(温熱処理後24hrで測定)とをそれぞれプロットし温熱処理時間〜生存率曲線を描いたところ、両者は各温度処理に対して、良好に相関した。種々の培養細胞株による温熱感受性の比較検討IMC-3cell、KBcell、及びLcellの三つの培養細胞株を用いて、43℃加温に対する温熱感受性を検討したところ、全ての培養細胞株おいて、ATP法は、コロニー法による温熱感受性を良好に反映していた。以上よりATP法は温熱感受性の簡便かつ迅速な評価法として非常に有用であると思われた。