破骨細胞形成におけるインターロイキン6の役割の解明

阐明白细胞介素 6 在破骨细胞形成中的作用

• 批准号: 06771640
• 负责人: 宇田川 信之
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771640/
• 关键词: 破骨細胞; IL-6; 可溶性IL-6レセプター; IL-11; gp130; 骨芽細胞

破骨細胞形成に関与するインターロイキン6(IL-6)のシグナル伝達系について解析し、以下の結果を得た。(1)骨芽細胞と脾細胞の共存培養系に、IL-6を添加しても破骨細胞の形成は促進されず、そこに可溶性IL-6レセプター(sIL'-6R)を添加すると破骨細胞の形成が認められた。また、IL-6のシグナル伝達分子であるgp130を共通のシグナル伝達分子として利用する他のサイトカインIL-11,Oncostatin M,LIFは単独で破骨細胞形成を促進した。(2)この共存培養系にデキサメタゾンを添加すると、IL-6単独でも破骨細胞の形成は促進された。(3)RT-PCRでIL-6レセプターの発現を調べたところ、破骨細胞の前駆細胞が存在する脾細胞あるいは骨髄細胞画分にそのmRNAは認められたが、骨芽細胞画分には認められなかった。一方、デキサメタゾンで骨芽細胞を処理すると骨芽細胞画分にもIL-6レセプターのmRNAが出現した。(4)ウエスタンブロット解析より、IL-11で処理した骨芽細胞には130kDaタンパク質のチロシンリン酸化は認められなかった。しかし、デキサメタゾンで骨芽細胞細胞を前処理した後にIL-6を添加すると、130kDaタンパク質のチロシンリン酸化が認められた。(5)ヒトIL-6Rを高度に発現するトランスジェニックマウスから得た骨芽細胞と正常マウスに由来する脾細胞の共存培養系で、ヒトIL-6は単独で破骨細胞の形成を促進した。しかし、マウスIL-6にはそのような促進効果は認められなかった。一方、ヒトIL-6Rトランスジェニックマウスの脾細胞と正常マウスに由来する骨芽細胞の共存培養系で、ヒトIL-6は破骨細胞の形成を促進しなかった。以上の結果より、破骨細胞形成を促進するgp130を介するシグナルは骨芽細胞に直接作用することが示された。

The relationship between osteoclast formation and IL-6 was analyzed. The following results were obtained. (1)Bone bud cells and spleen cells were cultured in vitro. IL-6 was added to osteoclast formation, and soluble IL-6 (sIL-6R) was added to osteoclast formation. IL-11,Oncostatin M,LIF are the only molecules that promote osteoclast formation. (2)IL-6 alone promotes the formation of osteoclasts in these co-culture systems. (3)RT-PCR detects the expression of IL-6 mRNA in spleen cells, osteoclasts and progenitor cells. The expression of IL-6 mRNA in bone bud cells was detected by PCR. (4)Bone bud cells were treated with IL-11, and the protein was purified by reverse osmosis. IL-6 was added to the cells after pretreatment, and the 130kDa protein was acidified. (5)IL-6R is highly expressed in cultured spleen cells derived from normal cells, and IL-6 alone promotes osteoclast formation. The IL-6 is the first to promote the development of the disease. IL-6 promotes the formation of osteoclasts in a culture line of bone bud cells derived from normal spleen cells. The above results indicate that osteoclast formation is promoted by gp130, and osteoclast formation is directly promoted by gp130.

项目成果

Takahashi,N.et al.: "Postmitotic osteoclast precursors are mononuclear cells which express macrophage-associated phenotypes." Dev.Biol.163. 212-221 (1994)

Takahashi,N.et al.：“有丝分裂后破骨细胞前体是表达巨噬细胞相关表型的单核细胞。”

Sasaki,T.et al.: "Expression of vacuolar H^+-ATPase in osteoclasts and its role in resorption." Cell Tissue Res.278. 265-271 (1994)

Sasaki,T.et al.：“破骨细胞中液泡 H+-ATP 酶的表达及其在吸收中的作用。”

Tanaka,S.et al.: "Possible involvement of focal adhesion kinase,p125^<FAK>,in osteoclastic bone resorption." J.Cell Biochem.in press. (1995)

Tanaka,S.et al.：“粘着斑激酶 p125^<FAK> 可能参与破骨细胞骨吸收。”

Nakamura,I.et al.: "Wortmannin,a specific inhibitor of phosphatidylinosi-tol-3 kinase,bolcks osteoclastic bone resorption." FEBS Lett.in press. (1995)

Nakamura,I.et al.：“渥曼青霉素，一种磷脂酰肌醇 3 激酶的特异性抑制剂，可阻止破骨细胞骨吸收。”