权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

動物細胞リボソームタンパク質生成の調節に関する研究

动物细胞核糖体蛋白产生调控研究

基本信息

批准号：
06772123
负责人：
懸川友人
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

マウスL32rpmRNAのポリピリミジン配列と特異的に結合し,このポリピリミジン配列を欠損したL32rp-mRNAには結合しないタンパク質:p56^<L32>の分離を行った。約30頭分の牛リンパ筋を精製の出発材料とし、細胞抽出物を超遠心分離、続いて、硫酸アンモニウム沈殿により分画した。更に、3頭分毎に核酸カラムであるoligo d(T)-celluloseおよび等電点・ラウリル硫酸ナトリウムの2次元ポリアクリルアミドゲル電気泳動で分画した。ゲル中のタンパク質をニトロセルロース膜に移し,^<32>P-標識したRNAを用いてノースウエスタンブロットの解析を行ったところ、等電点9〜10に分子量47kDaと3種の分子量44kDaの活性が認められ、タンパク質量は各々約1μgであった。このうち3種の分子量44kDaのタンパク質は、リン酸化の価数もしくは数個のアミノ酸の違いによるアイソザイムであると考えられた。それらの活性の特異性はポイント変異RNAへの結合が見られないことで確認された。各タンパク質のアミノ末端のアミノ酸配列の解析を試みたが、アミノ末端が修飾を受けているらしく、アミノ酸配列の決定には至らなかった。そこで、マウスにこれら4種のタンパク質を免疫したところ、分子量47kDaのタンパク質に対してのみ、免疫交差性のある血清が得られた。現在、ミエローマ細胞と免疫交差性を示したマウスの脾臓細胞を融合し、モノクローン抗体を調製中である。

L32 rp-mRNA binding sequence is specific, and L32rp-mRNA binding sequence is deficient<L32>. About 30 minutes of purified protein, extract, ultra-telecentric separation, sulfuric acid, precipitation, separation In addition, the 3-membered nucleic acid sequence is characterized by oligo d(T)-cellulose isoelectric point and 2-dimensional electrophoresis. The <32>molecular weight of each of the three species is about 1μg, and the isoelectric point is 9 ~ 10. The molecular weight of these three species is 44kDa, and the number of acids in these species is 44 kDa. The specificity of this activity is confirmed by the binding of different RNA molecules. The analysis of acid alignment at the end of each sample is carried out by test and modification at the end. 4 kinds of serum with molecular weight of 47kDa Now, the immune system of spleen cells is fused, and the immune system of spleen cells is modulated.