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酸化ストレスにより生成する過酸化リン脂質の血管病変における役割

氧化应激产生的磷脂过氧化物在血管病变中的作用

基本信息

批准号：
06772151
负责人：
唐澤健
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Teikyo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06772151/
关键词：
PAF 酸化リン脂質動脈硬化 PAF-アセチルヒドロラーゼ

项目摘要

本研究では、酸化ストレスにより産生されるPAF様酸化リン脂質の同定を行い、これらの酸化リン脂質の動脈硬化症をはじめとする血管病変における役割を明らかにすることを目的とした。まず、我々が既に作製した抗PAF抗体を用いて動脈硬化症患者より調整された病理標本を免疫組織化学的に解析した結果、動脈硬化巣の脂質蓄積部位が染色されることが示された。従って、動脈硬化巣にはPAFもしくはPAF様生理活性を示すリン脂質が蓄積している可能性が考えられる。更に、これらの酸化リン脂質の構造を明らかにし、その定量法を開発するために、SuccinoylPAFに対する抗体を作製しようと試みた。SuccinoylPAFに対する抗体を作製するための抗原を合成するにあたり、抗PAF抗体の場合と同じように、グリセロール1位のアルキル鎖末端にキャリアータンパク質との結合を可能にする官応基を導入しようとしたが、グリセロール2位のSuccinoyl基には遊離カルボキシル基が存在するため、目的の化合物を合成することは困難であった。そこで、このカルボキシル基を利用して、牛血清アルブミンと結合させた人工抗原を用いて、得られたウサギ抗血清の反応特異性を調べたところ、SuccinoylPAF以外のコリンリン脂質との交差反応性が観察され、SuccinoylPAFの化学構造が認識されていないことが分かった。今後、この酸化リン脂質に対する特異的抗体を得るための抗原を分子設計する際には、グリセロール2位のカルボキシル基を遊離状態にしておく必要があると思われた。一方、酸化リン脂質の代謝調節機構を明らかにするために、酸化リン脂質の分解酵素である血漿PAFアセチルハイドロラーゼの構造解析を実施した。既に、我々はモルモット血清よりこの酵素を単一に精製することに成功しているが、リジンエンドペプチダーゼ処理によって得られたペプチドフラグメントのアミノ酸配列を数カ所明らかにすることができた。現在、これらの部分アミノ酸配列を基に合成したオリゴDNAをPCRプライマーに用いて、cDNAクローニングを行っている。

In this study, PAF acidified lipids, atherosclerotic diseases, vascular diseases, blood vessels, blood vessels, lipids, lipids and lipids. The anti-PAF antibodies were detected in patients with sclerosis. the results of immunohistochemical analysis of the pathological markers and the staining results of the fat storage sites of the patients with sclerosis were analyzed. The physiological activity of PAF and PAF indicates the possibility of lipid accumulation. In general, acidified fat was used to make the assay, the quantitative method was used to open the assay, and the SuccinoylPAF antibody assay was used to test the antibody. SuccinoylPAF antibodies may be used as antigens, anti-PAF antibodies, antigens, antibodies, antibodies, antigens, antibodies, antibodies, antigens, antigens, Objective to synthesize the compound. The antisera of antisera, lipids, lipids, antigens, antisera, antisera, antisera, In the future, we acidified the specific antibodies of fat and fat to detect the molecular design of antigens. In the future, we found that the molecular design of antigens and the molecular design of antigens were very important. On the one hand, the acidified fat production system makes it clear that the acidified fat decomposes the enzyme, the blood PAF, the chemical analysis, and the analysis. Both I and I were told that the serum enzyme was not a good one, and that it was successful. I did not know how to treat it. I did not know how to do it. Now, in some parts of the system, we need to make sure that we are using DNA, PCR, and cDNA, and that we are going to have a lot of problems.