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高感度画像計測及び膜蛋白質運動測定による細胞応答の研究

使用高灵敏度图像测量和膜蛋白运动测量研究细胞反应

基本信息

批准号：
06780523
负责人：
太田善浩
金额：
$ 0.7万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780523/
关键词：
副腎皮質細胞カルシウム ATP ACTH

项目摘要

牛副腎皮質束・網状層の初代培養細胞をカルシウム感受性蛍光色素で染色し、カルシウム応答を観察した。細胞集団を用いた測定では、ATPで刺激する前は細胞内カルシウム濃度は約200nMであり、刺激後は最大で約300nMになった。刺激後速やかに最大値に到達した後徐々に減少し、約1分後に約240nMで一定値に達した。個々の細胞で観察すると、ATPやACTHの刺激に対しカルシウム応答を起こす細胞と起こさない細胞とが存在し、カルシウム応答を起こす細胞は全体の1割程度であった。カルシウム応答がステロイドホルモン合成とどうような関係を持つか調べるために、コレステロールプールである細胞内脂肪顆粒の分布、ステロイドホルモン合成酵素である3β-ヒドロキシステロイド脱水素酵素、シトクロムP450c21、シトクロムP450sccの細胞内分布を観察した。驚くべきことに、カルシウム応答をする細胞ではコレステロールを蓄える脂肪顆粒も、上記の3種類のステロイドホルモン合成酵素も殆ど認められず、逆にこれらはカルシウム応答をしない細胞において顕著に認められ、この性質は刺激物質の種類にはよらなかった。次に、コルチゾールを定量してカルシウムがステロイドホルモンの合成に果たす役割を調べると、細胞外カルシウムの流入はステロイド産生に重要な役割を持つことがわかった。以上の結果から、カルシウム応答をする細胞では直接ステロイドホルモンを合成していないものの、この細胞はカルシウム応答をしないステロイドホルモンを合成する細胞に何らかの影響を与えるステロイドホルモン合成を促進しているのかもしれないと考えられる。

The primary cultured cells of bovine adrenal cortical tract and reticular layer were examined for their sensitivity to photochrome staining and photochrome staining. The intracellular concentration of ATP was approximately 200nM prior to stimulation and the maximum concentration was approximately 300nM after stimulation. After stimulation, the maximum value is reached, and then the value decreases gradually. After about 1 minute, the value reaches a certain value. The cells were detected by ATP and ACTH stimulation, and the cells were activated by ATP and ACTH. The distribution of intracellular fat particles and the intracellular distribution of enzyme 3β-desaturase, S-P-450 c21, S-P-450 scc were observed. The cells in question are divided into three groups: fat granules, three types of fat granules, and enzymes. The cells in question are divided into three groups: fat granules, three types of fat granules, and enzymes. The cells in question are divided into three groups: fat granules, three types of fat granules, and enzymes. Second, the quantitative analysis of the cell cycle, the synthesis of the cell cycle, the regulation of the extracellular cell cycle, the inflow of the cell cycle, the production of the important cell cycle, the maintenance of the cell cycle. The above results show that the cells can directly synthesize the protein, and the cells can directly synthesize the protein, and the cells can directly synthesize the protein.