サイトカイニン高感受性突然変異体の分離による菌条(シュート)文化機構の研究

通过细胞分裂素高度敏感突变体的分离研究真菌芽培养机制

基本信息

批准号：
06854048
负责人：
柿本辰男
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06854048/
关键词：
サイトカイニンシュート分化菌条エンハンサータギング

项目摘要

植物のカルスにサイトカイニンを作用されると、カルス増殖、緑化、シュート誘導が引き起こされる。サイトカイニンによるシュート誘導の分子機構を調べることが本研究の目的である。エンハンサーを用いたタギングにより過剰発現すればシュートを誘導する遺伝子のクローニングをおこなった。シロイヌナズナのカルス50,000個のゲノムDNAにCaMV35Sエンハンサーを導入し、サイトカイニン非存在化でもシュートを再生する変異体を得た。その1系統よりDNAを抽出して導入されたエンハンサー周辺の植物DNAをクローニングした。このDNA断片はエンハンサーとともに植物に導入すればサイトカイニン非存在下でもシュートを誘導する。このことよりこのDNA断片にはサイトカイニン合成あるいはサイトカイニン受容からシュート誘導にいたる情報伝達系の遺伝子を含んでいると考えられる。このDNA断片の全塩基配列を決定した。今後これに対応するcDNAのクローニングを行なう。また、サイトカイニン情報伝達の研究に役立つと考えられるサイトカイニン高感受性突然変異体を7系統得た。現在これら突然変異体をもちいた生理学的実験と変異遺伝子座の染色体マッピングを行なっている。

细胞分裂素用于植物愈伤组织，导致愈伤组织增殖，绿化和射击诱导。这项研究的目的是研究细胞分裂素诱导芽的分子机制。通过使用增强子标记过表达诱导芽的基因被克隆。将CAMV35S增强剂引入了50,000个基因组DNA的拟南芥愈伤组织中，即使不存在细胞分裂素，也会再生的突变体。从该菌株中提取DNA，并克隆引入的增强子周围的植物DNA。当将DNA碎片与增强剂一起引入植物时，即使在没有细胞分裂素的情况下，也会引起芽。这表明该DNA片段包含信息传输系统的基因，范围从细胞分裂素合成或细胞分裂素接收到射击诱导。确定了该DNA片段的整个碱基序列。与此相对应的cDNA将来将被克隆。此外，获得了七个高度敏感的细胞分裂素突变体的菌株，这些菌株被认为对细胞分裂素信号的研究很有用。目前，正在进行这些突变体和突变基因座染色体图的生理实验。