イネPeroxidase遺伝子の構造および発現機構の解明

水稻过氧化物酶基因结构及表达机制的阐明

• 批准号: 06760065
• 负责人: 伊藤 浩之
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06760065/
• 关键词: イネ(Oryza sativa L.); peroxidase; 遺伝子構造; 形質転換植物; 遺伝子発現

高等植物のperoxidasesは病傷害に対する自己防衛反応、リグニン・細胞壁の合成などに関する重要な機能をもつと考えられている。すでに、イネ(Oryza sativa L.cv.Nipponbare)苗条より2種類のperoxidase cDNAsを単離し、それらの構造を解析した。Northern解析の結果、これらの遺伝子は根で恒常的に強く発現しているが、地上部では通常発現量が少なく、UV照射、障害処理およびエテフォン処理によりそれらの発現が強く誘導されることが明らかとなった。そこで、これらの発現特性を明らかにするために、まず両cDNAsに対応する遺伝子断片の単離を行った。各cDNAをプローブとして、約30万の組み換えファージからなるイネゲノミックライブラリーをスクリーニングし、それぞれ2個づつ陽性クローンを単離した。制限酵素地図の作成および塩基配列より、各cDNAに対応する2種類のperoxidase遺伝子を同定した。これらはいずれも3イントロン・4エクソンの構造をとっており、イントロンの挿入位置は両者とも同じであった。両遺伝子の翻訳開始点より上流のプロモーター領域に存在する既報のcis-因子の検索を行った結果、ストレス抵抗性に関与する多くの遺伝子で認められるエチレンに応答する因子、5^1-AGCCGCC-3^1、がいずれの遺伝子プロモーター領域にも存在した。このことは、Northern解析の結果と一致し、この因子が実際にここで単離したイネperoxidasesの発現にも働いている可能性を示すだけでなく、これらのperoxidasesがストレス抵抗性に関与する可能性があることを示唆した。さらに解析を進める上でプロモーター領域を削り込み、それらのプロモーターの活性およびストレス応答を調査する予定である。

The peroxidases of higher plants have important functions related to the synthesis of cell walls, such as self-defense against diseases and injuries. 2 kinds of peroxidase cDNAs were isolated and analyzed. The results of Northern analysis show that the root of the plant is strongly induced by UV irradiation, and the ground is strongly induced by UV irradiation. The gene fragments are isolated from the cDNA fragments. About 300,000 cDNAs were cloned into the genome, including two cDNAs. The two types of peroxidase genes are identical for each cDNA pair. The structure of the system is different from that of the system. The Cis-factor is the result of the test, the resistance is related to the resistance, and the number of Cis-factors is the factor, the 5^1-AGCCGCC-3^1, and the Cis-factor is the existence of the Cis-factor. The results of the Northern analysis are consistent with the probability of occurrence of peroxidases. This analysis is based on a survey of the activity and response of the target area.

项目成果

H.Ito et.al.: "Molecular cloning and characterization of two complementary DNAs encoding putative peroxidases from rice(Oryza sativa L.)shoots" Plant Cell Reports. 13. 361-366 (1994)

H.Ito 等人：“编码来自水稻（Oryza sativa L.）芽的推定过氧化物酶的两个互补 DNA 的分子克隆和表征”《植物细胞报告》。

N.Kishimoto et.al.: "RFLP mapping of a coding seguence for rice peroxidase:detection of a locus different from those determined by isozyme analyses." Jpn.J.Genet.69. 101-104 (1994)

N.Kishimoto 等人：“水稻过氧化物酶编码序列的 RFLP 作图：检测与同工酶分析确定的基因座不同的基因座。”