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大腸菌の細胞分裂を制御する因子の解析

控制大肠杆菌细胞分裂的因素分析

基本信息

批准号：
06760076
负责人：
和地正明
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06760076/
关键词：
カルシウム細胞骨格 cafA アルコールデヒドロゲナーゼ pcsA SOS dinD rpoB

项目摘要

培地中の高濃度のカルシウムによって生育が阻害される大腸菌変異株CS2-29と、高温での増殖が培地中のカルシウムに依存的になる変異株SH3450の解析を行った。CS2-29株のカルシウム感受性にかかわる変異を相補する遺伝子を、コスミドベクターを用いてクローン化した。得られたクローンはKoharaの大腸菌染色体整列クローンに対するハイブリダイゼーションによって大腸菌染色体地図上48分にマップされた。CS2-29株ではカルシウム処理により染色体DNAの断片化が引き起こされることを見い出した。同様に、SH3450株のカルシウム依存的増殖にかかわる遺伝子についてコスミドクローンを分離した。得られたクローンは90分にマップされた。サブクローニングの結果、RNAポリメラーゼβサブユニットをコードするrpoB遺伝子により温度感受性が回復されることがわかった。しかし、P1マッピングによりSH3450株はrpoB変異の他にもう一つの変異をもっていることが明らかとなった。過剰発現により細胞内に細胞骨格様構造体を形成するcafA遺伝子の破壊株cafA::cat株において、分子量100Kの蛋白質が過剰発現していることを見い出した。100K蛋白質のN末のアミノ酸配列を決定したところ,AdhE(アルコールデヒドロゲナーゼ)であることが明らかとなった。変異により低温で染色体分配異常を引き起こすpcsA遺伝子を、Koharaの大腸菌染色体整列クローンよりクローン化した。pcsA遺伝子はSOS遺伝子の一つであるdinD遺伝子と同一であることが明らかとなった(J.Bacteriol.,177:156-165,1995)。

High concentrations of E. coli strains CS2-29 and SH3450 were analyzed for growth inhibition in culture. CS2-29 strain has a wide range of sensitivity, and its genetic diversity is complementary to that of CS2 - 29. Coliform chromosome alignment was achieved by using the 48-minute chromosome alignment technique. CS2-29 strain was treated with chromosome DNA fragmentation. In the same way, SH3450 strain is isolated from its dependent colonies. I'm sorry. As a result of this, the RNA profile was changed to a temperature sensitive profile. P1 SH3450 The protein with molecular weight of 100K was found in the cafA strain and the cafA::cat strain. 100K protein and N end of the acid alignment decision,AdhE() The chromosome distribution of E. coli was abnormal at low temperature, and the chromosome distribution of E. coli was abnormal. pcsA (J.Bacteriol., 177:156-165,1995)。