熟成に伴う食肉の軟化に影響を及ぼすネブリンフィラメントの断片化に関する研究

老化过程中影响肉软化的星云丝碎片的研究

• 批准号: 06760229
• 负责人: 辰巳 隆一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06760229/
• 关键词: 熟成; 食肉の軟化; カルシウムイオン; ネブリン; 筋原線維; 細いフィラメント

抗ネブリンlgGをリガンドとしたアフィニティーカラムクロマトグラフィーにより筋原線維から遊離した5種類のネブリンサブフラグメントを従来法により分離・精製した。これにアセトンパウダーから調製したF-アクチンと結合させた複合体を調製し、0.1mM Ca2を含む溶液で処理すると、いずれのサブフラグメントもF-アクチンから解離し、上澄液に遊離することが分かった。また対照として、5mM EGTAを含む溶液で処理した場合には、サブフラグメントの解離は全く観察されなかった。更に、ネブリンサブフラグメントのF-アクチンからの解離のCa^<2+>濃度依存性を調べたところ、0.1mM Ca^<2+>で解離が最大に誘起される顕著なCa^<2+>濃度依存性を示した。このことは、F-アクチンとネブリンサブフラグメントとの結合はCa^<2+>の特異的な作用により解離することを示している。食肉の熟成に伴い、Ca^<2+>が筋小胞体から漏出し、サイトゾルのCa^<2+>濃度が約0.2mMに上昇することが知られている。この濃度は生筋の弛緩時の場合の約2,000倍に相当する。従って、食肉の熟成に伴い、多量のCa^<2+>がネブリンフィラメントに結合すると、断片化したネブリンフィラメントが細いフィラメントから解離し、サブフラグメントが遊離することが直接的に証明されたと共に、本研究の2つ目の研究計画(ネブリンサブフラグメントのF-アクチンからの遊離)が遂行された。これらの研究成果を日本畜産学会大会で発表した。また。1つ目の研究計画(ネブリンフィラメントの断片化機構の解明)は現在遂行中であり、200kDaおよび180kDaのサブフラグメントのC末端およびN末端の各々10残基のアミノ酸配列を決定し、200kDaおよび180kDaのサブフラグメントの接合部領域のペプチドを合成している最中である。今後この合成ペプチドを0.1mM Ca^<2+>で処理し2つのペプチドに分割することを確認したい。

5 kinds of anti-tumor drugs The complex was prepared with 0.1 mM Ca2 solution and dissociated with supernatant solution. In case of treatment with 5mM EGTA, the dissociation of EGTA was completely observed. Furthermore, the Ca^<2+> concentration-dependence of dissociation was adjusted to 0.1 mM Ca^<2+>, and the Ca^<2 +> concentration-dependence of dissociation was shown to be the maximum induced by Ca^<2+>. This is the first time that a Ca2 + compound has been used in the production of Ca2 +. During meat ripening, Ca^<2+> in muscle vesicles leaked out, and Ca^<2+> concentration in muscle vesicles increased by about 0.2 mM. This concentration is equivalent to about 2,000 times that of muscle relaxation. However, during the ripening of meat, a large amount of Ca^<2+> is combined with the raw material, and the fragmented raw material can be dissociated from the raw material, and the raw material can be dissociated from the raw material. This is a direct proof. Together, the two main research projects of this study (the dissociation of the raw material from the F-section of the raw material) have been carried out. The research results were presented at the Japan Animal Husbandry Society Conference.また。1. The research project of the present invention (elucidation of fragmentation mechanism of protein fragments) was carried out to determine the acid alignment of each of the 10 residues at the C-terminal and N-terminal ends of the protein fragments of 200kDa and 180kDa, and to synthesize the protein fragments of the junction domain of 200kDa and 180kDa. In the future, this synthesis will be carried out at 0.1mM Ca^<2+>.