マウスCD5遺伝子およびその機能と解析

小鼠CD5基因及其功能与分析

基本信息

  • 批准号:
    06760267
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.64万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1994
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1994 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

CD5は分子量67,000の細胞表面糖タンパク質であり、すべてのT細胞と一部のB細胞上に発現する。CD5分子はCD72(B細胞上に存在)と結合して細胞内のセリンキナーゼ活性を持つ分子へシグナルを渡しているといわれ、またCD5分子の刺激はプロテインキナーゼCの活性化を誘導する。本年度はCD5分子を発現するトランスジュニックマウスの作製を計画し、CD5遺伝子がゲノムに組み込まれたと考えられるマウスを数系統樹立した。1.トランスジェニックマウスの作製SV40プロモータ、マウス抗体重鎖遺伝子エンハンサを用いてマウスCD5cDNA発現用DNAコンストラクトを作製した。このDNAコンストラクトをL細胞およびSP2/0細胞へトランスフェクトしてCD5分子を細胞表面上に発現することを確認した後、C57/BL6×C3H/HeN F1マウスの受精卵に顕微注入し偽妊娠マウスに卵管移植した。マウスのスクリーニング生まれてきたマウスの尾よりゲノムDNAを抽出し、ゲノムDNA上でイントロンをはさむと考えられる2カ所のエクソン部位より作製したプライマーを用いてPCR反応を行ない、イントロンを含まない短いバンドを検出したマウスを数匹選出した。このマウスは今のところ、外見的には同腹の他の仔とは変化が見られない。現在、このマウスを繁殖させており、一部の子孫では約半数に親同様のバンドがPCR法で認められるので、導入した遺伝子がメンデル遺伝していると考えられる。このマウスを用いて解析を進めて行く予定である。なお、本実験は東京大学農学部動物育種学教室および同応用遺伝学 教室の協力を得て行なった。
CD5 has a molecular weight of 67,000 and is present on cell surface glycoproteins, T cells and some B cells. The CD5 molecule and CD72 (present on B cells) bind to and maintain the activity of the intracellular active molecule.グナルを多しているといわれ、またCD5 molecule のstimulation はプロテインキナーゼCのactivation をinducing する. This year's CD5 molecule is currently in production and is planned to The CD5 legacy がゲノムに组み込まれたと考えられるマウスを number system is established. 1. SV40 プロモータ, マウス Antibodies Re-locked Relics manufactured by Toroman Biotechnology Co., Ltd.エンハンサをいてマウスCD5cDNA発 is now made of DNAコンストラクトを.このDNAコンストラクトをL cell およびSP2/0 cell へトランスフェクトしてC After confirming the presence of D5 molecules on the cell surface, C57/BL6×C3H/HeN F1 fertilized egg is micro-injected and pseudo-pregnancy is transferred to the fallopian tube. MATCH Extract the し、ゲノムDNA on the でイントロンをはさむとtest えられる2カのThe エクソンより produced by the したプライマーを was reacted with いてPCR 応を行ない, The short いバンドを検出したマウスをselected した.このマウスは日のところ, external appearance of には Same belly の他の子とは変化が见られない. Now, the このマウスをbreeding させており, one part of the descendants では are related to the same 様のバンドがP CR method is to recognize the められるので, to introduce the した伝子がメンデル伝していると考えられる.このマウスを Use いて to analyze を advance and めて行 く predetermined である. Naina and Honami are both members of the Animal Breeding Classroom of the Faculty of Agriculture, University of Tokyo, and are co-operators in the Animal Breeding Classroom of the Faculty of Agriculture, University of Tokyo.

项目成果

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