骨髄異形成症候群におけるbcl-2遺伝子発現とアポトーシスに関する研究

骨髓增生异常综合征中bcl-2基因表达与细胞凋亡的研究

• 批准号: 06770115
• 负责人: 黒滝 日出一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770115/
• 关键词: 骨髄異形成症候群; アポトーシス; bcl-2

【材料】骨髄異形成症候群(MDS)についてrefractory anemia(RA)3例、RA with excess of blasts(RAEB)7例、白血病化したRAEB5例、de novoAMIL5例、計20例の骨髄穿刺吸引組織ないし骨髄生検組織を用いた。白血病化したRAEBは白血病化の前後で同一の症例を使用し、比較した。コントロールとして正常骨髄3例を用いた。全て10%ホルマリン固定、パラフィン包埋されたもので行った。新鮮な材料を用いたbcl-2遺伝子再構成の検出については症例がうまく収集できず、data解析する段階まで行えなかった。【材料】Apoptosis(Apo)の発現を検出するためTdT-mediated-digoxigenin nick end labeling法(ApopTag^<TM>,Oncor社)を用いて行い、bcl-2遺伝子再構成の替わりにbcl-2遺伝子蛋白の発現について抗bcl-2 oncoprotein抗体(DAKO)を用いて免疫組織化学染色を行った。【結果】Apoならびにbcl-2蛋白の発現について作製した標本を対物100倍の油浸レンズを用い,骨髄組織中の細胞を約1,000個算定し,個々の症例における陽性率を求めた.コントロールではApo1.77±0.44(mean±SD),bcl-2蛋白0.35±0.09であり,以下同様にRA6.99±4.96,5.16±3.32,RAEB7.09±2.51,6.40±3.34,白血病化したRAEBでは白血病化の前後で3.45±2.26→0.64±0.49,12.02±5.45→27.06±13.09,de novo AMLでは0.26±0.11,39.03±11.31であった.すなわちMDS(RAとRAEB)では正常よりApoおよびbcl-2蛋白の発現が目立った.白血病化によりApoの頻度は低下し,bcl-2蛋白の発現が著明になり,de bovo AMLのレベルとほぼ同等であった.以上の結果よりApoはMDSにおける造血細胞の異形成の原因の一つと考えられ,また,無効造血の原因としても一つの役割を担っていると考えられた.また,白血病ではMDSの状態よりもApoの出現頻度は低下しており,白血病に移行したRAEB症例において,白血病化によりApoが有意に発現低下を認めている.白血病化したRAEBでは,MDSの段階で非白血病化RAEBよりも低いApo及び高いbcl-2蛋白発現を示し,白血病化の前後においても有意差を認めており,これらの因子(Apoとbcl-2蛋白発現)はMDSの白血病化の指標の一つになる可能性が考えられた.

Materials: Bone marrow formation syndrome (MDS) included refractory anemia(RA) in 3 cases, RA with excess of blasts(RAEB) in 7 cases, leukemia RAEB in 5 cases, de novo AMIL in 5 cases, and bone marrow aspiration in 20 cases. Leukemia before and after the use of RAEB, the same case, comparison 3 cases of bone marrow failure All 10% Fresh materials are used in bcl-2 gene reconstruction, and the symptoms are collected and analyzed. [MATERIALS] Detection of Apotosis (Apo) by TdT-mediated-digoxigenin nick end labeling (ApopTag^<TM>,Oncor) and detection of bcl-2 oncoprotein by bcl-2 gene recombination (DAKO) by immunohistochemical staining. [Results] Apo-2 protein expression was detected in about 1,000 cells in bone marrow tissue, and the positive rate was calculated in each case. Apo1.77±0.44(mean±SD),bcl-2 protein 0.35±0.09, RA6.99± 4.96, 5.16 ± 3.32, RAEB 7.09 ± 2.51, 6.40 ±3.34, leukemia-RAEB 3.45±2.26→0.64± 0.49, 12.02 ±5.45→27.06± 13.09, de novo AML 0.26±0.11, 39.03±11.31であった. The expression of Apo and bcl-2 protein in RAEB is normal. The frequency of Apo in leukemia is decreasing,bcl-2 protein expression is obvious,de bovo AML is equally important. The above results show that Apo MDS is not suitable for hematopoietic cell differentiation. The frequency of Apo occurrence in leukemia is lower than MDS status, leukemia is transitional to RAEB syndrome, leukemias are lower than Apo intentionally. The expression of bcl-2 protein is low and high in RAEB, and the expression of bcl-2 protein is low in RAEB, and the expression of bcl-2 protein is high in RAEB, and the expression of bcl-2 protein is high in RAEB.