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IgE産生制御に関わる寄生虫抗原の分子生物学的研究

参与 IgE 产生控制的寄生虫抗原的分子生物学研究

基本信息

批准号：
06770184
负责人：
松本直樹
金额：
$ 0.7万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770184/
关键词：
寄生虫 T細胞 IL-4 IFN-α サイトカイン cDNA 発現ベクター

项目摘要

蠕虫感染症においては、血清IgE濃度の上昇と好酸球の増多が宿主の反応として特徴的に観察される。この反応はIL-4,IL-5を産生するTh2タイプT細胞が選択的に活性化されることが原因と考えられる。本研究では、げっ歯類動物腸管に寄生するNippostrongylus brasiliensis(Nb)を感染させたマウスをモデルとしてTh2タイプT細胞によって認識される抗原を中心に解析を行った。Nb感染マウスでは腸間膜リンパ節細胞による寄生虫抗原特異的なIL-4産生とともにIFN-γの産生が観察された。この2種のサイトカイン産生を誘導する寄生虫抗原についてゲル濾過により分離したところIL-4は分子量40,000を中心とする画分により、IFN-γは分子量17,000を中心とする画分の抗原により産生が誘導され、異なる抗原分子がIL-4,IFN-γの産生を誘導していることが明らかになった。現在、IL-4産生を誘導する抗原を非常に高い比活性にまで精製することに成功しており、性状解析を進めている。抗原分子の精製と並行して、IL-4産生T細胞によって認識されるNb抗原遺伝子をクローニングするため、日本住血吸虫グルタチオンS-トランスフェラーゼcDNAをモデルに用いてcDNA発現系とアッセイ系の構築を行った。これによりプロテインAとの融合タンパク質を発現する大腸菌発現ベクターpRIT2T上でcDNAライブラリーを構築し、発現させた融合タンパク質をT細胞培養系に加え、培養液中に放出されるサイトカインを測定する系を確立した。現在、Nb成虫mRNAからcDNAライブラリーを作製中であり、今後、上記の方法でスクリーニングを行う予定である。

Worm infection symptoms, serum IgE levels, good acid balls, multiple hosts, anti-worms, anti-virus, anti-virus, anti-infection, anti-infection, anti-infection, The reason for the activation of the selected IL-4,IL-5 is not known as the cause of the Th2. In this study, parasitic Nippostrongylus brasiliensis (Nb) infection caused by parasitosis, infection, infection and infection. Nb was infected with IL-4 specific to parasite antigens, IFN- gamma antibodies, and cytopathic agents. The parasite antigens were isolated from the parasite antigens by the molecular weight of 40000, the molecular weight of IL-4 was 40000, the molecular weight of IFN- was 17000, and the molecular weight of IFN- γ was 17000. The antigens were purified, and the antigens of the antigens were purified. At present, the antigen of IL-4 is very high, the specific activity of antigen is very high, the specific activity of antigen is very high, and the specific activity of antigen is very high. Antigen molecules were detected concurrently, IL-4 was born in T cells, and antigens were detected in NB antigens. Antigens were detected in sera of Schistosoma japonicum, Schistosoma japonicum, and Schistosoma japonicum, in which cDNA was used. In the pRIT2T, the cDNA was detected. The cell culture system was added. The cell culture system was added to the culture solution. At present, the adult Nb worm, mRNA adult cDNA disease, is in progress, and in the future, the last method is to determine whether or not the adult worm will be affected.