ルイス陰性遺伝子の同定とその遺伝子頻度の決定

Lewis阴性基因的鉴定及其基因频率的测定

• 批准号: 06770330
• 负责人: 神田 芳郎
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770330/
• 关键词: ルイス陰性遺伝子; ルイス式血液型; 遺伝的多型; 個人識別; 親子鑑定

ルイス陰性(le)遺伝子の508番目のG→Aへのmutation(508A)を検出するためのプライマーをデザインし、これを利用して15例のルイス陽性ならびに12例のルイス陰性個体の白血球ゲノムDNAを鋳型としてPolymerase Chain Reastion-Restriction Fragment Length Polymorphism(PCR-RELP)法により508Aの頻度を調べたところルイス陽性個体では30allele中4alleleであったのに対し、ルイス陰性個体では24allele中12alleleとle遺伝子に特異的であることがわかった(Vox Sanguinus,67,327-328,1994)。又、508Aのle遺伝子に認められた59番目のT→Gへのmutation(59G)を調べるためのプライマーもデザインし、これを利用したPCR-RELP法を用いて59Gの発現頻度を調べたところ、このmutation遺伝子に特異的であることが示された(ルイス陽性個体30allele中4allele、ルイス陰性個体では24allele中18allele)(Submitted)。現在更に症例数を増やして、これらのmutationの遺伝子頻度を調査中である。又、lr遺伝子の内59G、508Aを共に持たないものが存在したので現在これらのle遺伝子についてそのprotein-coading regionをゲノムDNAよりPCR増幅し、ヌクレオチドのシークェンスを調べるとともに真核細胞発現ベクターにくみ込み真核細胞に発現させた後、ルイス抗原の発現、酵素活性等を解析中である。いままでルイス血液型はその判定の困難さと、ある特定の状態(例えば悪性腫瘍、妊娠等)によってその型が変化することから、親子鑑定等の個人識別には用いにくかったが、今回の遺伝子の多型を用いることによって、親子鑑定等に用いることも可能と考えられる。実際の親子鑑定の試料を用いてこの可能性についても、現在検討中である。

A mutation(508A) of the negative (le) gene 15 of the 15 positive individuals and 12 of the 12 negative individuals were found to have DNA polymorphism. Polymerase Chain Reastion-Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RELP) method: 508A frequency modulation: 4allele in 30allele positive individuals; 4allele in 24allele negative individuals; 508A frequency modulation: 4allele in 30allele positive individuals; 4allele in 24allele negative individuals; 508A frequency modulation: 508A frequency modulation: 5 In addition, 508A mutation gene recognition is 59 T→G mutation(59G), which is used to adjust the frequency of occurrence of 59G mutation gene by PCR-RELP method (Submitted). Now the number of cases is increasing, and the mutation frequency is increasing. In addition, 59G and 508A of the lr gene are present in the protein coding region of the gene, and the protein coding region of the gene is analyzed by PCR amplification, PCR amplification, and enzyme activity. The difficulty of determining the type of blood type, the difficulty of determining the specific state (e.g., sexual swelling, pregnancy, etc.), the difficulty of determining the type, the difficulty of determining the type, The actual paternity test sample is used in the possibility of testing, and the current investigation is in progress.

项目成果

Yoshiro Koda: "Detection of G to A Missense Mutation of Lewis-Negative Gene by PCR on Genomic DNA" Vox Sanguinis. 67. 327-328 (1994)

Yoshiro Koda：“通过基因组 DNA 的 PCR 检测 Lewis 阴性基因的 G 到 A 错义突变”Vox Sanguinis。