骨髄メイ・ギムザ染色における蛍光in situ 分子雑種法を用いた腫瘍細胞の同定

骨髓 May-Giemsa 染色荧光原位分子杂交鉴定肿瘤细胞

• 批准号: 06770575
• 负责人: 百名 伸之
• 金额: $ 0.32万
• 依托单位: University of the Ryukyus
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770575/
• 关键词: 蛍光 in situ 分子雑種法; 造血器腫瘍; 染色体異常

1.目的:蛍光in situ分子雑種法(FISH)により造血器腫瘍の細胞形態と遺伝学的特徴との関連を検討する。2.対象:正常コントロールは寛解期の造血器腫瘍患者の骨髄塗沫標本を用いた。また染色体分析で8番トリソミ-を認めた急性骨髄性白血病の1例で検討を行った。3.方法:塗沫標本はメイ・ギムザ染色の後アルミ箔に包み-20℃で保存した。FISHを行う前に解凍し、カラーテレビカメラを装着した光学顕微鏡でビデオテープに録画した。その後塗沫標本を熱処理変性、冷却し、次にプローブDNA(今回は8番およびY染色体のセントロメアプロープを用いた)を熱処理変性させた後、塗沫標本に播種し、37℃で一晩ハリブリダイズさせた。プローブの検出はアビジン-FITCあるいは抗ジゴキシゲニン-FITCで行った。ビデオの細胞形態を参照しながら蛍光顕微鏡でプローブを蛍光シグナルとして検出した。4.結果:正常コントロールでは8番のセントロメアプローブで2個のシグナルが認められた。3検体での細胞系統別の検出効率はリンパ球91.7±3.5%、芽球95.2±8.3%、骨髄球系92.3±2.2%、好酸球87.5±12.5%値赤芽球系92.4±4.5%、単球95.5±5.3%であった。3個のシグナルはそれぞれ2.2%、0.3%、0.0%であった。8番トリソミ-の症例では、異性間骨髄移植後の再発時に61.2%に3個のシグナルが認められた。また、3個のシグナルは系統別にリンパ球3.0%、芽球96.4%、骨髄球系84.0%、好中球62.3%、好酸球26.7%、赤芽球系65.4%、単球100.0%であり、リンパ球以外への腫瘍クローンの分化が認められた。キメリズムをYプローブで検討したところ、リンパ球はドナー由来、他の系統はキメラの状態であった。5.今後の計画:本研究により細胞形態と遺伝学的特徴との関連を明らかにできることが示された。今後さらに多数例での検討を行う予定である。

1. Objective: To investigate the relationship between cytomorphological and genetic characteristics of hematopoietic tumors by FISH. 2. Contrast: normal blood circulation and bone marrow smear in patients with hematopoietic tumors during remission. A case of acute osteoblastic leukemia was identified by chromosome analysis. 3. Methods: After dyeing, the coated plum was preserved at-20 ℃. Before FISH, there was a freeze, a freeze, and an optical microscope. After heat treatment, the coating material is changed, cooled, and then the DNA (now 8 ° C and Y chromosome) is changed. After heat treatment, the coating material is sown at 37 ° C.プローブの検出はアビジン-FITCあるいは抗ジゴキシゲニン-FITCで行った。The cell morphology of the tumor was observed under microscope. 4. Results: 8 times the normal number of cases, 2 times the normal number of cases. The detection efficiency of cell system in 3 models was 91.7 ± 3.5% in green ball, 95.2 ± 8.3% in bud ball, 92.3 ± 2.2% in bone ball, 87.5 ± 12.5% in acid ball, 92.4 ± 4.5% in red bud ball and 95.5 ± 5.3% in single ball. 3 8 cases were found to have a high recovery rate after heterosexual bone transplantation (61.2%) and 3 cases were found to have a low recovery rate (1.8%). The results showed that there were 3 groups of different systems: 3.0%, 96.4%, 84.0%, 62.3%, 26.7%, 65.4%, 100.0%. The origin of the game, the status of the game, the game. 5. Future projects: This study aims to clarify the relationship between morphological and genetic characteristics of cells. In the future, most cases will be discussed.