皮膚、特に乾癖表皮細胞および外毛根鞘細胞におけるチロシンリン酸化酵素の発現

酪氨酸激酶在皮肤中的表达，特别是在银屑病表皮细胞和外根鞘细胞中

• 批准号: 06770627
• 负责人: 山田 伸夫
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770627/
• 关键词: RT-PCR; IL4; IL5; Tyrosine Kinase; Mite Antigen; Patch Test; Atopic Dermatitis

先に提出した科研費交付申請書の、本年度の実施計画の3項目のうち、2項目は達成し得た。すなわち、正常表皮角化細胞と外毛根鞘細胞を手術標本より分離、培養し、培養細胞よりmRNAを抽出しWilks Primerを用いてRT-PCRを行い、1回目のPCR産物の電気泳動のゲル上より帯状のバンドを切り出し、そこからQIAGENのキットを用いてDNAを抽出し、それを鋳型として、nested primerを用いて2回目のPCRを行った。もう一度その産物の電気泳動のゲルより産物のDNAを回収し、PCR vectorとligationを行った。更に今後ligationの産物を大腸菌にtransfectし、cloningしてinsertのtyrosine kinaseのsequencingを行う必要がある。RT-PCRの皮膚疾患への応用としては、他にアトピー性皮膚炎のダニ抗原誘発皮疹におけるTH_2系サイトカイン(IL4、IL5)およびTNFαのup-regalationを検出し、Journal of Allergy and Clinical Immunology誌にacceptされた。

First, に submit the application form for the payment of <s:1> た research funds <e:1>, うち for Project 3 of the <s:1> implementation plan <e:1> of this year, and に for project 2. If successful, た will be obtained. Youdaoplaceholder0, normal epidermal keratinocytes と, outer hair root sheath cells を, surgical specimens よ すなわち, isolation and culture of <s:1>, cultured cells よ, mRNAを extraction of <s:1> Wilks Primer を with い て rt-pcr を い, 1 pa2 の の PCR products electric 気 swimming の ゲ ル on よ り 帯 shape の バ ン ド を り し, cutting そ こ か ら QIAGEN の キ ッ ト を with い て DNA を spare し, そ れ を type where と し て, nested Primer を with い PCR line を っ て 2 の pa2 た. も う once そ の product の electric 気 swimming の ゲ ル よ り product の DNA を back 収 し, PCR vector と ligation を line っ た. Further に in the future, the ligation <s:1> product を coliform にtransfect <s:1>, cloning てinsert <s:1> tyrosine kinase <e:1> sequencingを is う necessary がある. Rt-pcr の skin disorders へ の 応 with と し て は, he に ア ト ピ ー sex dermatitis の ダ ニ antigen induced 発 rash に お け る TH_2 department サ イ ト カ イ ン (IL4, IL5) お よ び TNF alpha の up - regalation を 検 し, Journal of Allergy and Clinical Immunology journal にacceptされた.