ヒト皮膚肥満細胞の免疫機能分子(アトピー性皮膚炎と高親和性IgEレセプター)

人体皮肤肥大细胞的免疫功能分子（特应性皮炎及高亲和力IgE受体）

• 批准号: 06770685
• 负责人: 早川 信一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770685/
• 关键词: 皮膚肥満細胞; 表面抗原; 高親和性IgEレセプター; 分離法

Collagenaze+hyaruronidazeによる酵素処理とpercoll不連続密度勾配遠心法を用いて手術材料皮膚からのヒト皮膚由来肥満細胞(以下SMC)の分離に関してはほぼその手技は確立できた。すなはち1gの皮膚から約10^6個のSMCが得られた(その純度は50〜70%程度)。次に得られたSMCのサイトスピン標本を作成して、APAAP法による免疫組織化学染色により各種の表面抗原の検索を行なった。その結果、クラスI抗原、IgE,CD29,43,45,49d,49e,61およびCD68が陽性であった。またクラスII抗原,CD11a,49fは弱陽性で、CD11c,18,54,c-kitは陰性であった。さらに近年同定された高親和性IgEレセプターの存在も確認された。まだ症例数が少ないが、アトピー性皮膚炎患者皮膚の酵素処理より得られたSMCの細胞表面抗原のパターンもほぼ正常皮膚のそれと一致していた。ただ問題点としては、生検材料が無菌的でないために上記の方法で分離したSMCを無菌的に培養を続けることが不十分であり、そのためサイトカイン刺激や長期培養による形態や機能分子の変化を観察することが難しかった。またアトピー性皮膚炎患者病変部皮膚の凍結切片を用いて免疫組織染色により表皮ならびに真皮の単位面積あたりの高親和性IgEレセプター陽性細胞を検索したところ、アトピー性皮膚炎患者では正常人と比較して表皮、真皮とも高親和性IgEレセプター陽性細胞が著明に増加していた。しかも表皮ではランゲルハンス細胞の一部に高親和性IgEレセプターが陽性であり、真皮では肥満細胞や真皮ランゲルハンス細胞以外にも高親和性IgEレセプター陽性の細胞が存在するようであった。今後は症例を増やして、統計学的解析を急ぐ予定である。

Collagenaze+hyaruronidaze enzyme treatment percoll non-continuous density matching remote center application of surgical materials skin separation of skin derived fat cells (SMC) related to the establishment of hand techniques About 10^6 SMCs were obtained from the skin (purity: 50 ~ 70%). In addition, the expression of SMC and APAAP was detected by immunohistochemistry. Results: CD29,43,45,49d,49e,61 CD68. II antigen, CD11a, 49f weakly positive, CD11c,18,54,c-kit negative. In recent years, the existence of high-affinity IgE has been confirmed. The number of cases was very small, and the enzyme treatment of skin in patients with dermatitis was consistent with that of normal skin. The problem is that the material is sterile, and the method of isolation and culture of SMC is sterile. The high affinity IgE positive cells in epidermis and dermis were detected by immunohistochemical staining in frozen sections of diseased skin from patients with dermatitis, and increased in comparison with normal individuals. Some of the cells in the epidermis and dermis are highly affinity IgE positive, while some of the cells in the dermis are highly affinity IgE positive. In the future, the analysis of symptoms and statistics should be determined.