ヒト皮膚肥満細胞の免疫機能分子(アトピー性皮膚炎と高親和性IgEレセプター)

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Collagenaze+hyaruronidazeによる酵素処理とpercoll不連続密度勾配遠心法を用いて手術材料皮膚からのヒト皮膚由来肥満細胞(以下SMC)の分離に関してはほぼその手技は確立できた。すなはち1gの皮膚から約10^6個のSMCが得られた(その純度は50〜70%程度)。次に得られたSMCのサイトスピン標本を作成して、APAAP法による免疫組織化学染色により各種の表面抗原の検索を行なった。その結果、クラスI抗原、IgE,CD29,43,45,49d,49e,61およびCD68が陽性であった。またクラスII抗原,CD11a,49fは弱陽性で、CD11c,18,54,c-kitは陰性であった。さらに近年同定された高親和性IgEレセプターの存在も確認された。まだ症例数が少ないが、アトピー性皮膚炎患者皮膚の酵素処理より得られたSMCの細胞表面抗原のパターンもほぼ正常皮膚のそれと一致していた。ただ問題点としては、生検材料が無菌的でないために上記の方法で分離したSMCを無菌的に培養を続けることが不十分であり、そのためサイトカイン刺激や長期培養による形態や機能分子の変化を観察することが難しかった。またアトピー性皮膚炎患者病変部皮膚の凍結切片を用いて免疫組織染色により表皮ならびに真皮の単位面積あたりの高親和性IgEレセプター陽性細胞を検索したところ、アトピー性皮膚炎患者では正常人と比較して表皮、真皮とも高親和性IgEレセプター陽性細胞が著明に増加していた。しかも表皮ではランゲルハンス細胞の一部に高親和性IgEレセプターが陽性であり、真皮では肥満細胞や真皮ランゲルハンス細胞以外にも高親和性IgEレセプター陽性の細胞が存在するようであった。今後は症例を増やして、統計学的解析を急ぐ予定である。