IL-4による造血幹細胞の増殖,分化機構の解析

IL-4分析造血干细胞增殖分化机制

• 批准号: 06857033
• 负责人: 柳澤 浩介
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06857033/
• 关键词: IL-4; 造血幹細胞; 分化,増殖; ME-F2; ME-F3; チロシンキナーゼ; ras蛋白

IL-4による造血幹細胞の増殖、分化機構の解析コロニー刺激因子をはじめとするサイトカインは造血幹細胞のみならず、白血病細胞の分化、増殖をも刺激することが明らかとなっており、白血病治療における臨床面での応用が期待されているが、その作用機序については不明の点が多い。本研究の目的はサイトカインによる分化、増殖反応における細胞内シグナル伝達機構を明らかにすることである。本年度はIL-4によるシグナル伝達機構を解析した。我々が樹立した白血病細胞株ME-1のサブクローンであるME-F2,ME-F3はIL-4により、それぞれ増殖、分化反応を示す。そして、この反応はチロシンキナーゼ阻害剤であるハービマイシンにより、完全に抑制された。ME-F2,ME-F3をIL-4で刺激し、抗フォスフォチロシン抗体を用いてウエスタンブロッティングをおこない、各種蛋白の迅速かつ一過性のチロシンリン酸化を認めた。抗GAP血清を用いた免疫沈降により、ME-F2ではIL-4刺激により、GAPのチロシンリン酸化およびras蛋白の活性化(GDP-rasよりGTP-rasへの転換)が起こっていて、一方ME-F3ではGAPのリン酸化は認められず、活性化rasへの変換も無い事が明らかとなった。MAPキナーゼの活性化はME-F2,F3共認められなかった。オンコジーンであるc-myc,c-fosの解析においては、ME-F2ではIL-4によりc-myc増幅、c-fos抑制、ME-F3ではc-myc抑制、c-fos増幅と全く逆の反応を示した。以上の結果より、IL-4によるME-F2の増殖機構はras制御蛋白であるGAPのチロシンリン酸化→活性ras蛋白への転換→癌遺伝子c-mycの増幅、c-fosの抑制という機構により引き起こされている事が明らかとなった。一方、分化反応については、GAPのリン酸化、rasの活性化は見られず、他の種類のチロシンキナーゼが活性化され、GAP以外の蛋白をリン酸化し、c-myc抑制、c-fos増幅を引き起こす機構が考えられた。

IL-4 plays an important role in the analysis of hematopoietic stem cell proliferation and differentiation mechanism. There are many unknown points in the mechanism of action of IL-4. The purpose of this study is to clarify the differentiation, propagation and mechanism of intracellular differentiation and reproduction. This year's IL-4 test results show that We established ME-F2,ME-F3 leukemia cell lines that express IL-4, IL-2, IL-4, IL-4, IL- All right, all right. ME-F2,ME-F3 and IL-4 stimulate, anti-inflammatory antibodies are used in the rapid development of various proteins. Anti-GAP serum was used to immunize and neutralize IL-4, GAP protein and ras protein (GDP-ras protein and GTP-ras protein). ME-F3 was used to immunize and activate ras protein. MAP ME-F2,F3 C-myc,c-fos analysis, ME-F2, IL-4, c-myc amplification, c-fos suppression, ME-F3, c-myc suppression, c-fos amplification, and reverse. The results showed that IL-4 induced ME-F2 proliferation mechanism was related to ras protein regulation, GAP regulation, ras protein activation, c-myc amplification and c-fos inhibition. One side, differentiation, reverse transcription, GAP acidification, ras activation, other types of protein activation, GAP protein acidification, c-myc inhibition, c-fos amplification, and other mechanisms

项目成果

Kohsuke Yanagisawa他: "Interleukin-4 in chronic myelomonocytic leukemia" Acta Haematol.92. 104-108 (1994)

Kohsuke Yanagisawa 等人：“慢性粒单核细胞白血病中的白介素 4”Acta Haematol.92 (1994)。