白血病細胞の分化と増殖の機序の解析

白血病细胞分化增殖机制解析

• 批准号: 05857056
• 负责人: 柳澤 浩介
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05857056/
• 关键词: 白血病細胞; 増殖・分化; サイトカイン; シグナル伝達機構

コロニー刺激因子をはじめとするサイトカインは造血幹細胞のみならず、白血病細胞の分化、増殖をも刺激することが明らかとなっており、白血病治療における臨床面での応用が期待されているが、その作用機序については不明の点が多い。本研究の目的はサイトカインによる白血病細胞の分化、増殖における細胞内シグナル伝達機構を明らかにすることである。本年度はIL-3、IL-4の2つのサイトカインによるシグナル伝達機構を解析した。我々が樹立した白血病細胞株ME-1はサイトカインに反応して分化増殖反応を示す。このME-1のクローニングを行ない、サイトカインに対して増殖反応のみを示すME-F2、分化反応のみを示すME-F3の2つのサブクローンを分離した。この2つのサブクローンを用いて以下の検討を行った。まずプロテインキナーゼCの関与をみるため、特異的阻害剤であるH-7を培養系に加え、IL-3、IL-4による増殖、分化反応への影響をみたが、H-7ではいずれの反応も阻害されなかった。次にIL-3、IL-4刺激によるME-F2、ME-F3の細胞質、細胞膜におけるプロテンキナーゼC活性の変化を^<32>P-APTを用いて測定したが、いずれのサブクローンでも 活性の変化はみられず、プロテインキナーゼCの関与は少ないと考えられた。次にチロシンキナーゼの関与について検討した。特異的阻害剤であるハービマイシンAを培養系に添加するとIL-3、IL-4によるME-F2、ME-F3の増殖、分化反応はいずれも濃度依存性に阻害された。今後チロシンキナーゼによるME-F2、ME-F3細胞の蛋白のリン酸化の有無、リン酸化される蛋白の同定を行う予定である。

The mechanism of action of these stimulatory factors in hematopoietic stem cell differentiation and proliferation is unknown. The aim of this study is to clarify the differentiation and proliferation of leukemia cells. This year, IL-3 and IL-4 were analyzed for their detection mechanisms. We have established a leukemia cell line ME-1 that is resistant to differentiation. ME-F2, ME-F3 and ME-F3 are the two main components of the ME-1 and ME-F3. The following questions are discussed in the discussion section. The relationship between IL-3 and IL-4 and the inhibition of cell proliferation and differentiation in H-7 cells was studied. IL-3 and IL-4 stimulate the cytosol and cell membrane of ME-F2 and ME-F3, and the activity of ME-F2 and ME-F3 is measured by <32>P-APT. The next step is to open the door and close the door. Specific inhibition factors such as IL-3, IL-4, ME-F2, ME-F3, ME-F3, ME-F-F3, MEF-F3, MEF-F- In the future, ME-F2 and ME-F3 cells will have different protein levels.