S. mutans ピルビン酸ギ酸リアーゼ遺伝子(pfl)の発現調節機構の解析

变形链球菌丙酮酸甲酸裂解酶基因(pfl)表达调控机制分析

• 批准号: 07771676
• 负责人: 山本 康人
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771676/
• 关键词: Streptococcus mutans; pfl gene; Pyruvate formate-lyase; sugar alcohol metabolism

S. mutansの糖代謝において、特に歯垢深部の様な高度の嫌気的条件下では、ラジカル酵素であるピルビン酸ギ酸リアーゼ(PFL)がNAD/NADHバランスに重要な役割をはたしている。申請者らはS. mutansの染色体DNAにランダム変異を導入し、大腸菌以外では未だクローニングされていなかったピルビン酸ギ酸リアーゼ遺伝子(pfl)をクローニングし、その全塩基配列の決定(S. mutansのpflは塩基数2.325kbで、コードされているアミノ酸残基数は775、分子量は87, 533Daであった。Yamamoto, Y., et al., 1996, Infect. Immun., vol. 64 : 385-391)とこの遺伝子の上流域および下流域の塩基配列の解析を行った。S. mutansのpflは、大腸菌のpflがこの酵素の活性化酵素遺伝子(act)と供に近接して存在し、ArcAやFNRらのタンパク質によってその嫌気的条件下での誘導が制御されているのに対し、申請者らによるこの遺伝子の上流域および下流域の塩基配列解析の結果(pflの上流域には0.6kb異常のORFを、下流域にも約1.7kbのORFの存在を確認し、これらの領域の挿入失活変異株をつくり糖アルコール代謝性への影響を検討したが、大きな変化は確認できなかった。)から単独で存在することが示唆され、また本菌のように呼吸鎖を持たない菌ではFNRタンパク質は存在しないとされる等の理由から、大腸菌のそれとは明らかに異なった発現調節を受けているものと考えられた。さらに申請者は、pflの発現がS. mutans内で容易にモニターできる融合遺伝子を作成し、種々の発酵条件下におけるpflの発現調節機構を明らかにしようと考え、大腸菌において融合遺伝子(pfl :: lacZ, S. mutansにはβ-ガラクトシダーゼが存在しない)を構築している。

S. Mutans sugar metabolism in the middle, especially in the deep under highly toxic conditions, such as enzyme, NAD/NADH, acid release (PFL), important service. Applicant S. Mutans chromosome DNA sequence variation introduced into the genome, other than Escherichia coli, the genome of the mutant (pfl), the genome of the mutant (S. coli). Mutans pfl base number 2.325kb, DNA residue number 775, molecular weight 87,533 Da Yamamoto, Y., et al., 1996, Infect. Immun., vol. 64 : 385-391) The analysis of the basic arrangement of the upper and lower watersheds of the S. Mutans pfl, E. coli pfl, enzyme activation enzyme act, supply, control, induction and control under conditions of presence, presence, and presence of a mediator, FNR, and FNR.(The presence of a 0.6 kb ORF anomaly in the upper and 1.7 kb ORFs in the lower part of the pfl was confirmed, and the presence of an inactivated mutant in the upper and lower parts of the pfl region was confirmed.) The reason for the existence of a single organism is that it is resistant to infection and infection, and that it is resistant to infection and infection. Today, the applicant is against, pfl's discovery is S. Mutans are easy to produce, seed and ferment fusion vectors. Under fermentation conditions, pfl is easy to produce and regulate fusion vectors. Mutans are constructed in the middle of the beta-

项目成果

Yamamoto, Y., et al.: "Cloning and sequence analysis of the pfl gene encoding pyruvate formate-lyase form streptococcus mutans" Infection and Immunity. 64. 385-391 (1996)

Yamamoto, Y. 等人：“编码变形链球菌丙酮酸甲酸裂解酶的 pfl 基因的克隆和序列分析”感染和免疫。