歯周組織におけるCD44アイソフォーム発現の検討

牙周组织中CD44亚型表达的检查

• 批准号: 07771746
• 负责人: 平野 裕之
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771746/
• 关键词: 歯周組織; CD44分子; アイソフォーム; RT-PCR

我々は慢性辺縁性歯周炎炎症局所で見られるリンパ球浸潤を中心とした炎症病態解明に向けて、リンパ球とヒト歯肉線維芽細胞(HGF)との細胞間接着の解析を行い、ヒアルロン酸レセプターとして知られるCD44分子がこの細胞接着に関与していることを明らかにしている。一方、CD44分子は種々のアイソフォームを有し、糖鎖による修飾やmessengerRNA(mRNA)レベルでの修飾でその機能を変化させることが知られている。そこで今回歯周組織でのCD44分子及びそのアイソフォームの発現を蛋白及びmRNAレベルで検討した。歯肉組織片を抗-CD44抗体で染色したところ角化上皮を除く全ての構成細胞にその発現が検出された。詳細な解析のために歯肉線維芽胞(HGF)、歯根膜細胞(HPDL)、歯肉上皮細胞(HGEC)をin vitroに単離し、FACS,免疫沈降反応によりCD44蛋白を検出したところ、各細胞は同様に表面にCD44分子を発現していたがHGECは他の細胞が有する約90kDaの分子に加え、約130-150kDaのCD44分子を発現していた。ノーザンブロッティングによる解析ではHGECは高分子に偏位したCD44特異バンドを発現していた。更にCD44分子多様性を詳細に調べるためにCD44分子の細胞外ドメインに存在する可変エクソン挿入部位を囲むPCRプライマーを設定し、RT-PCR法によるアイソフォームの検出を行った。エチジウムブロマイドDNA染色では、HGF,HPDLは可変エクソンを含まないCD44mRNAを発現していたがHGECは800bp付近を中心に複数の産物を有していた。RT-PCR産物をサザンブロッティング法により検出した結果、HGECは10種類以上のアイソフォームを有することが明らかとなった。今後、CD44アイソフォームと歯周組織に於けるその機能の関係を解析する予定である。

In the center of the chronic inflammatory disease bureau, we explained the inflammatory disease in the center of chronic inflammatory disease, and then analyzed the cell of HGF, then analyzed the cell of CD44 molecule. On the one hand, a variety of CD44 molecules are available, and glucose is used to repair messenger RNA (mRNA). The machine is capable of improving the information of the machine. This week, we organized CD44 molecules and mRNA molecules to detect protein and protein expression. In the meat group, anti-CD44 antibody staining showed that the keratinized epithelium was removed to form a complete cell cycle. The spores (HGF), root membrane cells (HPDL), meat epithelial cells (HGEC), in vitro isolates and FACS were analyzed by immuno-precipitation. The CD44 protein was detected by immunoprecipitation. The CD44 molecules were expressed on the surface of each cell. The HGEC molecules were expressed in other cells, and the 90kDa molecules were added and about 130-150kDa molecules were found in other cells. We need to analyze the HGEC polymer offset CD44 special device to show that there is a high molecular weight. The CD44 molecular multiplicity is different. The CD44 molecular is extracellular. There is a location where you can enter the PCR. The RT-PCR method does not let you go out of the box. The DNA stain, the HGF,HPDL dye, the CD44mRNA dye, the HGEC 800bp, the complex number, the number of the data, the number of the complex data. The results of the RT-PCR test and the results of more than 10 kinds of HGEC are verified by the method of testing. In the future, the CD44 organization will be responsible for the prediction of the information system.

项目成果

平野裕之: "ヒト歯周組織におけるCD44分子のアイソフォーム発現について" 炎症. (発表予定). (1996)

Hiroyuki Hirano：“关于人类牙周组织中 CD44 分子同种型的表达”炎症（待发表）。