ISH法を用いた歯周病関連菌の局在観察と歯周外科療法への診断的応用

ISH法对牙周病相关细菌的定位观察及其在牙周手术治疗中的诊断应用

• 批准号: 07771814
• 负责人: 浅井 昭博
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Aichi Gakuin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771814/
• 关键词: 歯周病; ISH法; 歯周外科; 歯周組織; 歯周ポケット; 細菌; DNA; 歯肉

歯周病の原因である細菌は、Porphyromonas gingivalis, Actinomyces viscosus等の嫌気性細菌が有力とされているが、従来の方法による細菌採取では、歯周ポケットに限局した採取とならざるを得なかった。外科療法は歯周治療に占めるウエートは大きいが、歯周外科処置の細菌学的考察は困難とされていた。歯周病の発症や進行の機序解明に関する分野において、歯周ポケットのみならず、ポケット以外の歯周組織への細菌の侵入による局在の様子を明らかにし、実際に歯周病関連菌の侵入を受けている歯肉組織を歯周外科処置にて除去し得ているか、in situ Hybridization(ISH)法を含めて細菌学的に観察をすることを目的とした。歯周外科処置により除去した歯周組織を標本とし、P. gingivalisのFim遺伝子の約0.96kbp HincII-BsmI断片DNAプローベをもとに、従来検出不可能あるいは極めて困難であった歯周組織内への細菌の侵入、局在の様子を観察する方法を得た。その有効性を検証するために、歯周ポケット内においては従来の培養法を用い、歯周外科療法の効果実証を行った。細菌検査は歯周外科処置前後および対照菌について実施し、併せて臨床効果判定を行った。現在、歯周外科処置時に標本を採取することにより、P. gingivalisが歯周ポケット内のみに限局せず、歯周組織内に広範に侵入していることを明らかにしつつある。また、各種歯周病関連菌に対する培養法による結果を基に薬剤投与法の検討を行い、Local Drug Delivery System応用による塩酸ミノサイクリンの歯周局所への投与の有効性を細菌学的・臨床的に実証し、塩酸ミノサイクリンを含有したストリップスタイプ歯周病薬「SDP」を開発し、発表した。今後、“Checkerboard"DNA-DNA Hybridizationを行い、観察可能な歯周病関連菌の菌種を増やす予定である。

The cause of the disease is bacteria, Porphyromonas gingivalis, Actinomyces viscosus and other pathogenic bacteria. Surgical therapy is a major component of dental therapy, but it is difficult to investigate the bacteriology of dental treatment. The aim of this study is to identify the mechanisms involved in the development of peridental diseases, including the identification, removal, in situ Hybridization(ISH) and bacteriological investigation of the invasion of bacteria associated with peridental diseases into peridental tissues other than peridental tissues. A method for detecting the presence of bacteria in peripheral tissues and the presence of DNA fragments of about 0.96 kbp HincII-BsmI in peripheral tissues was developed. The results of the culture method and the peridental surgical therapy are demonstrated. Bacteriological examination is performed before and after dental surgery, and the clinical results are determined. Now, when the dental surgery is performed, it is necessary to take the following measures: P. genivalis, the limit of the dental tissue, the invasion of the dental tissue, etc. In addition, the culture method of various dental disease-related bacteria, the results of basic drug administration method, the application of local Drug delivery System, the effective drug administration method, the clinical bacteriological evidence, the drug administration system, the inclusion of the drug, the development and development of the dental disease agent "SDP." In the future,"Checkerboard"DNA-DNA Hybridization will be carried out to detect the growth of possible disease-related bacteria.

项目成果

浅井 昭博: "塩酸ミノサイクリン含有ストリップスタイプ歯周病薬の臨床的および細菌学的研究" 日本歯周病学会誌. 37. 706-724 (1995)

Akihiro Asai：“含盐酸米诺环素的条形牙周药物的临床和细菌学研究”日本牙周病学会杂志 37. 706-724 (1995)。

野口 俊英: "辺縁性歯周炎の急性症状に対する塩酸ミノサイクリン含有局所投与薬剤の臨床的および細菌学的評価" 日本歯周病学会誌. 37. 725-736 (1995)

Toshihide Noguchi：“含有盐酸米诺环素的局部给药药物治疗边缘性牙周炎急性症状的临床和细菌学评价”日本牙周病学会杂志 37. 725-736 (1995)。