ディーゼル排気微粒子の内皮機能障害および低密度リポ蛋白変性作用についての研究

柴油机尾气颗粒物内皮功能障碍及低密度脂蛋白变性作用研究

• 批准号: 07780463
• 负责人: 池田 雅彦
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780463/
• 关键词: ディーゼル排気微粒子(DEP); 内皮依存性弛緩反応; 内皮由来弛緩因子(EDRF); 低密度リポ蛋白(LDL); 酸化LDL

ディーゼル排気微粒子(DEP)の肺での炎症発生の機構を明らかにするため,内皮機能と低密度リポ蛋白(LDL)変性に対するDEPの作用について検討した.ラット胸部大動脈血管リング標本をDEP懸濁液と37℃,10分インキュベーション後,Phenylephrineで前収縮させAcetylcholineによる内皮依存性弛緩反応(EDR)を測定した.DEPは10μg/mlからEDRを抑制し,100μg/mlで約85%抑制した.DEP(10μg/ml)によるEDRの抑制は,スーパーオキシド(O_2^<・->)消去剤,Superoxide dismutase(SOD)の前処置により完全に抑制された.しかしDEP(100μg/ml)によるEDRの抑制は,SODにより30〜40%しか抑制されなかった.このことからDEPのEDR抑制作用は,DEPから産生されたO_2^<・->によるものとその他の因子によることが明らかとなった.EDRは内皮細胞(ED)で産生,放出され平滑筋を弛緩させる内皮由来弛緩因子(EDRF)の作用によることが知られている.そこでブタ胸部大動脈よりECを単離培養し,Bradykinin刺激によるEDRF産生に対するDEPの作用を検討した.DEP懸濁液はECと10分のインキュベートにより,0.1μg/mlより濃度依存的にECからのEDRF産生を抑制し,100μg/mlでほぼ完全に抑制した.このことからDEPは内皮細胞に作用し,EDRFの産生を抑制することが示唆された.酸化変性LDLは動脈硬化発症因子として知られているが,近年炎症発症に対する関与が注目されている,DEP懸濁液(1〜100μg/ml)をブタ血清より精製したLDLと37℃,60分インキュベートすると,酸化LDLの指標である共役ジエンの生成,電気陰性荷電の増加,マクロファージへの取り込み増加とコレステリルエステル蓄積が認められ,DEPがin vitroでLDLを酸化変性することが示された.以上の研究から,肺胞に蓄積したDEPより産生されたO_2^<・->やDEP中の可溶性物質が密接して存在する毛細血管のECや血液中のLDLに作用し,抗炎症作用をもつEDRFに対する抑制作用や酸化LDLの生成により肺での炎症を惹起する可能性が考えられた.

デ ィ ー ゼ ル row 気 particles (DEP) の lung で の inflammation 発 raw の institutions を Ming ら か に す る た め, endothelial function と low density リ ポ protein (LDL) - に す seaborne る DEP の role に つ い て beg し 検 た. ラ ッ ト chest large arteries リ ン グ specimen を DEP suspension と 37 ℃, 10 points イ ン キ ュ ベ ー シ ョ ン after Pheny Before lephrine で 収 shrinkage さ せ Acetylcholine に よ る endothelial dependency relaxation against 応 (EDR) determination of を し た. DEP は 10 mu g/ml か ら EDR を inhibit し, 100 mu g/ml で about 85% inhibition し た. DEP (10 mu g/ml) に よ る EDR の inhibit は, ス ー パ ー オ キ シ ド (O_2^< · ->) eliminator,Superoxide Dismutase (SOD) の 処 before buy に よ り に completely inhibit さ れ た. し か し DEP 100 mu (g/ml) に よ る EDR の inhibit は, SOD に よ り 30 ~ 40% し か inhibit さ れ な か っ た. こ の こ と か ら DEP の EDR inhibition は, DEP か ら produce さ れ た O_2 ^, < - > に よ る も の と そ の の factor に he よ る こ と が Ming ら か と な っ た. EDR は endothelial cells (ED) で, release さ れ smooth muscle を atony さ せ る endothelial origin relaxing factor (EDRF) の role に よ る こ と が know ら れ て い る. そ こ で ブ タ chest artery よ り EC を 単 from cultivating し, Bradykinin stimulus に よ る ED RF produce に す seaborne る DEP の role を beg し 検 た. DEP suspension は EC と 10 の イ ン キ ュ ベ ー ト に よ り, mu 0.1 g/ml よ り concentration dependent に EC か ら の EDRF を an adverse し, 100 mu g/ml で ほ ぼ に completely inhibit し た. こ の こ と か ら DEP は endothelial cells に し, EDRF の Produce を inhibition する とが とが abetting された. Acidification - sex LDL 発 は arteriosclerosis disease factor と し て know ら れ て い る が, in recent years, inflammatory disease of 発 に す seaborne る masato and が attention さ れ て い る, DEP suspension (1 ~ 100 mu g/ml) を ブ タ serum よ り refined し た LDL と 37 ℃, 60 イ ン キ ュ ベ ー ト す る と, acidification LDL の index で あ る ジ total service エ ン の generation, electricity 気 negative charged の rights, マ ク ロ フ ァ ー ジ へ の take り 込 み raised plus と コ レ ス テ リ ル エ ス テ ル accumulation が recognize め ら れ, DEP が in vitro で LDL を acidification - sex す る こ と が shown さ れ た. Above の research か ら, lung cell に accumulation し た DEP よ り produce さ れ た O_2 ^, < - > や の soluble substances in the DEP が contact し て exist す る capillary の EC や の LDL in the blood に し, antiinflammatory effects を も つ EDRF に す seaborne る inhibition や acidification LDL の generated に よ り lung で の inflammation を provoked す る possibility が exam Youdaoplaceholder0.

项目成果

M.Ikeda,M.Suzuki,K.Watarai,M.Sagai,T.Tomita: "Impairment of endothelium-dependent relaxation by diesel exhaust particles in rat thoracic aorta" The Japanese Journal of Pharmacology. 68. 183-189 (1995)

M.Ikeda、M.Suzuki、K.Watarai、M.Sagai、T.Tomita：“柴油机尾气颗粒对大鼠胸主动脉内皮依赖性松弛的损害”《日本药理学杂志》。

M.Ikeda,M.Shitashige,H.Yamasaki,M.Sagai,T.Tomita: "Oxidative modification of low density lipoprotein by diesel exhaust particles" Biological and Pharmaceutical Bulletin. 18. 866-871 (1995)

M.Ikeda，M.Shitashige，H.Yamasaki，M.Sagai，T.Tomita：“柴油机尾气颗粒对低密度脂蛋白的氧化修饰”生物和药物通报。