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アレルギー反応の画像解析法による研究

利用图像分析方法研究过敏反应

基本信息

批准号：
07780578
负责人：
古野忠秀
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.細胞膜上でのIgEレセプター動態の観察シアニン標識したIgEを好塩基球細胞株または肥満細胞株に結合させ、抗原刺激に伴う動態を画像解析法により観察したところ、IgEレセプターが架橋された後細胞内へ取り込まれる過程が観察できた。また、IgEレセプターのβ鎖及びγ鎖のC末端ドメインを欠損させた細胞株では、細胞内への取り込みが起こらないことも明らかになった。2.核内カルシウムシグナルの追究好塩基球細胞株の核を単離し、種々の刺激に伴うカルシウムイオン動態を追究した。単離核の核膜周辺には、小胞体が存在しており、画像解析法により小胞体内のカルシウムイオン濃度と核内のカルシウムイオン濃度の測定に成功した。イノシトール三リン酸(IP_3)を単離核に与えると、カルシウムイオン濃度は小胞体で減少し核内で上昇することが分かった。3.細胞骨格構成蛋白質の重合過程の解析蛍光性分子ロータを用いてラット腹腔肥満細胞の骨格構成蛋白質の脱重合・重合過程を測定したところ、脱顆粒反応に伴い骨格構成蛋白質が強く重合していることが明らかになった。4.脱顆粒反応のイメージング細胞内顆粒に存在する膜蛋白質CD63に対するモノクローン抗体を作製し、脱顆粒反応に伴い細胞膜表面に発現するCD63の蛍光抗体法によるイメージング技術を確立した。これにより、生きた単一細胞での脱顆粒反応をリアルタイムで観察することが可能になった。また、IgEレセプターのβ鎖及びγ鎖のC末端ドメインを欠損させた細胞株では、CD63の発現が起こらなかった。

1. Detection of IgE levels on cell membranes and identification of IgE levels in cell lines and cell lines. Detection of IgE levels on cell membranes and identification of IgE levels in cell lines and cell lines. Detection of IgE levels in cell lines and cell lines. The C-terminal sites of the β-and γ-lockers of the IgE gene are deficient in cell lines and intracellular cells. 2. Nuclear isolation, seed stimulation, and cell dynamics were investigated. The results showed that the concentration of cytokinin and cytokinin was successfully determined by image analysis method. The concentration of IP_3 in the nucleus decreases and increases in the nucleus. 3. Analysis of the recombination process of cellular skeletal proteins in vivo and in vitro 4. To establish a method for the production of anti-CD63 antibodies to the membrane protein CD63 in the presence of degranulation and degranulation, and for the production of CD63 antibodies to the membrane protein CD63 in the presence of degranulation and degranulation. This is the first time that a cell has been de-granulated. The expression of CD63 in cell lines with defective C-terminal sites of β-and γ-lockers was detected.