ホルモンによるウナギの精子形成開始の分子機構;生殖細胞の分化マーカーの検索

激素诱导鳗鱼精子发生的分子机制；寻找生殖细胞分化标志物

• 批准号: 07740639
• 负责人: 小林 亨
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07740639/
• 关键词: 精子形成; 生殖細胞; 分化; DEAD-box

人工飼育下のニホンウナギの精巣は、脊椎運動で唯一、精子形成をin vitro系で完全に再現することができる。この時、精子形成の開始は、生殖腺刺激ホルモン(GTH)-11-ketotestosterone-アクチビンBという経路で誘起される。今回、この精子形成の開始の分子機構を明らかにするために、精子形成の開始に伴って生殖細胞で発現の変化する遺伝子を検索することを試みた。GTH処理後、0、3日目(精原細胞が増殖し始める)の精巣組織より、poly(A)^+・RNAを調製し、サブトラクション法、RNA differential display法を用いて、発現の促進される遺伝子と抑制される遺伝子を検索した。得られた遺伝子断片をプローブにして、ノーザン解析をした結果、発現の促進されるもの、抑制されるもの、それぞれ、2、3ケの遺伝子断片を得た。この中で、発現の促進されるもの、抑制されるもの、それぞれ、2、3ケの遺伝子断片を得た。この中で、発現の促進されるもの一つ(RD3-3)をプローブとして、ウナギ精巣cDNAライブラリーをスクリーニングし、完全長のORFを含むcDNAクローンを単離した。シークエンスした結果、この遺伝子は、DEAD-box protein familyに属することが、明らかとなった。このクローンは、DEAD-box protein familyの一員であるmvh,RVLG,XVLG1とアミノ酸レベルで、約70%の相同性を示した。ノーザン解析をした結果、精巣、卵巣で発現が認められたが、脳、肝臓、心臓、頭腎などでは、発現が認められなかった。精子形成の開始に伴う、この遺伝子の発現は、精子形成の開始と共に増大し、GTH処理後、9日でピークに達した。また、in situ hybridizationを行った結果、この遺伝子の発現は、生殖細胞に限られること、精原細胞から第一次精母細胞にかけてみられることが明らかとなった。最近、この遺伝子のコードするタンパク質を特異的に認識する抗体が得られるので、現在、タンパクの局在、タンパク量の変化について検討している。

After artificial rearing, the sperm test was performed, the spinal motility was unique, and the spermatogenesis in vitro system was completely reproduced. At the beginning of spermatogenesis, gonadal stimulation test (GTH)-11 murketotestosterone-gonadal stimulation pathway begins. At the beginning of spermatogenesis, the molecular mechanism of spermatogenesis has announced that the beginning of spermatogenesis and the beginning of spermatogenesis have been confirmed by the molecular mechanism of spermatogenesis and the beginning of spermatogenesis. After GTH treatment, 0,3 days (spermatogonia colonization) sperm tissue, poly (A) ^ + RNA cell cycle, RNA differential display method and RNA differential display method were used to promote the inhibition of spermatogonia. The results of the analysis of the results of the fragments, the results of the analysis, the promotion of the results, the suppression of the fragments, the results of the analysis, the results In the middle and the present, we can promote the quality of the fragments, restrain the fragments, and make sure that the fragments are broken in the middle and the third. Now that you are in the market, you can use RD3-3 to improve your performance. You will need to use your cDNA to improve your performance. If you are full-length ORF, you will need to know if you are not allowed to do so. Please check the results. Please check the results. If you want to use DEAD-box protein family, you will need to know if you want to know if you want to. A member of the DEAD-box protein family team will tell you that the mvh,RVLG,XVLG1 is not valid, and that about 70% of the data are the same. After analyzing the results, sperm and egg samples, you can see that your heart, heart, liver, heart, heart, liver, liver, heart, heart The companion of spermatogenesis at the beginning of spermatogenesis, the detection of spermatozoa, the beginning of spermatogenesis, the beginning of GTH and the 9th day of spermatogenesis. The results of the experiments, the results of the in situ hybridization test, the detection of the reproductive cycle, the restriction of the reproductive cell, the first spermatocyte of the spermatozoa, the first spermatozoa of the spermatozoa, the pregnancy of the spermatozoa, the pregnancy of the spermatozoa. Recently, you have received a lot of information about the specific antibody. Now, you are in the market, and you need to know how much you can do.

项目成果

Kobayashi,T.and Nagahama,Y.: "Isolation of germ-specific genes expressed during proliferation of spermatogonia in Japanese eel,Anquilla iaponica." Zool.Sci.12. 71- (1995)

Kobayashi,T. 和 Nagahama,Y.：“日本鳗鱼精原细胞增殖过程中表达的细菌特异性基因的分离。”