色素体ゲノム機能を制御する色素体核構築タンパク質の同定と単離

控制质体基因组功能的质体核组装蛋白的鉴定和分离

基本信息

  • 批准号:
    07740613
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.7万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1995
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1995 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

タバコ培養細胞BY-2の色素体は、オーキシン(0.2mg/1の2,4-D)を含む通常の培地中では未分化名原色素体の状態を保つが、オーキシンのかわりにサイトカイニン(1mg/1のBA)を含む改変培地中では大量のデンプンを蓄積し、アミロプラストへと分化する。一方、タバコ植物体の葉肉細胞中には葉緑体が存在する。これら3種の色素体からそれぞれの色素体核(DNA-タンパク質複合体) を単離し、色素体ゲノムの転写・複製活性を比較した。原色素体の場合、細胞の増殖初期過程で一過的にDNA合成が活性化されるが、転写活性はほぼ一定のレベルを保つ。アミロプラスト分化過程では、DNA合成、転写ともに活性は低下する。成熟した葉緑体では原色素体に比べDNA合成活性は約1/4に低下しているが、転写活性は約15倍に上昇していた。このようにそれぞれ特徴的な機能を示す原色素体核、アミロプラスト核、葉緑体核を構成するタンパク質のうち、DNA結合性タンパク質をサウスウェスタン法により比較した。原色素体核およびアミロプラスト核に共通する主要なDNA結合性タンパク質は78, 64,および50kDaである。その他に原色素体核およびアミロプラスト核に特異的なDNA結合性タンパク質も検出されている。また、葉緑体核の主要なDNA 結合性タンパク質は120, 70, 50,および26kDaであった。これらのDNA結合タンパク質の殆どは3M Nacl/5M尿素処理により可溶化されるが、葉緑体核特異的70-および26-kDaタンパク質は一部不溶性画分に残留する。これら難溶性のDNA結合タンパク質は葉緑体核と膜系との結合に関与している可能性がある。また、単離原色素体核を用いてゲル内アッセイ法により色素体ポリメラーゼ(116 kDa)を検出した。現在、このDNAポリメラーゼ量の変化と色素体ゲノムの複製活性との間に相関関係が見られるかどうか検討している。
タ バ コ cultured cells BY - 2 の chromatophore は, オ ー キ シ ン の (0.2 mg / 1, 2, 4-d) contains を む の usually in petty で は of undifferentiated state of primary ferrite の を bartender つ が, オ ー キ シ ン の か わ り に サ イ ト カ イ ニ ン (1 mg / 1 の BA) contains を む change - in the petty で は large の デ ン プ ン を accumulation し, ア ミ ロ プ ラ ス ト Youdaoplaceholder0 differentiates する. One side, in the mesophyll cells of the タバコ plant body, に に chloroplasts が exist する. こ れ ら three の chromatophore か ら そ れ ぞ れ の chromatophore nuclear DNA - タ ン パ ク mass complex) を 単 し, plastid ゲ ノ ム の planning, write copy, active を compare し た. Primary ferrite の occasions, cell の raised early colonization process after で に DNA synthesis が activeness さ れ る が, planning to write activity は ほ ぼ certain の レ ベ ル を つ. The differentiation process of ア ロプラスト ロプラスト, DNA synthesis, 転 writing と に に activity is low する. Mature し た chloroplast で は primary ferrite に than べ DNA synthesis active low は about 1/4 に し て い る が about 15 times, planning to write activity は に rise し て い た. こ の よ う に そ れ ぞ れ な function of 徴 を す in primary ferrite cores, ア ミ ロ プ ラ ス ト nuclear and chloroplast nuclear を す る タ ン パ ク qualitative の う ち, DNA associativity タ ン パ ク qualitative を サ ウ ス ウ ェ ス タ ン method に よ り compare し た. Primary ferrite core お よ び ア ミ ロ プ ラ ス ト nuclear に common す る main な DNA associativity タ ン パ ク は 78, 64, お よ び 50 kda で あ る. そ の he に primary ferrite core お よ び ア ミ ロ プ ラ ス ト nuclear DNA に specific な associativity タ ン パ ク qualitative も 検 out さ れ て い る. Youdaoplaceholder0, chloroplast nucleus <s:1>, main なDNA binding タ パ パ, であった, 120, 70, 50,および26kDaであった. こ れ ら の dna-binding タ ン パ ク qualitative の perilous ど Nacl は 3 m / 5 m urea 処 Richard に よ り solubilization さ れ る が nuclear and chloroplast specific 70 - お よ び 26 - kDa タ ン パ ク qualitative は an insoluble draw points に residual す る. こ れ ら difficult soluble の dna-binding タ ン パ ク mass は chloroplast nuclear と と film system is の combining に masato and し て い る possibility が あ る. ま た, from primary ferrite 単 nuclear を い て ゲ ル within ア ッ セ イ method に よ り chromatophore ポ リ メ ラ ー ゼ (116 kDa) を 検 out し た. Now, こ の DNA ポ リ メ ラ ー ゼ quantity の variations change と chromatophore ゲ ノ ム の replication activity と の に phase between masato masato wearing が ら れ る か ど う か beg し 検 て い る.

项目成果

期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
酒井 敦: "色素体の機能と分化" 「細胞工学」別冊 植物細胞工学シリーズ3 植物の分子細胞生物学. 110-123 (1995)
Atsushi Sakai:“质体的功能和分化”《细胞工程》专卷植物细胞工程系列3植物分子细胞生物学110-123(1995)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Atsushi Sakai et al.: "AMYLOPLAST FORMATION IN CULTURED TOBACCO CELLS; EFFECTS OF PLANT HORMONES ON MULTIPLICATION. SIZE. AND STARCH CONTENT." Plant Cell Reports. (in press). (1996)
Atsushi Sakai 等人:“培养烟草细胞中淀粉体的形成;植物激素对增殖、大小和淀粉含量的影响。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Atshushi Sakai et al.: "ISOLATION OF CELL-NUCLEI, PLASTID-NUCLEI, AND MITOCHONDRIAL-NUCLEI FROM CULTURED TOBACCO CELLS" Plant and Cell Physiology. 37 (in press) supplement. (1996)
Atshushi Sakai 等人:“从培养的烟草细胞中分离细胞核、质体核和线粒体核”植物和细胞生理学。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
酒井 敦: "オルガネラによる植物細胞増殖の制御" 研究ジャーナル. 18 (4). 18-22 (1995)
Atsushi Sakai:“细胞器对植物细胞增殖的控制”研究杂志 18 (4) (1995)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
酒井 敦: "タバコ培養細胞BY-2の増殖初期における選択的オルガネラDNA合成の誘導機構の解析" 日本植物学会第59回大会研究発表記録. 275-275 (1995)
Atsushi Sakai:“培养烟草细胞 BY-2 增殖早期选择性细胞器 DNA 合成的诱导机制分析”第 59 届日本植物学会年会上的研究报告笔记 275-275 (1995)。
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  • 作者:
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  • 资助金额:
    $ 0.7万
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    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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