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雌雄異株植物を用いた性染色体と生殖器官特異的遺伝子群に関する分子細胞学的解析

使用雌雄异株植物对性染色体和生殖器官特异性基因进行分子细胞学分析

基本信息

批准号：
09262204
负责人：
酒井敦
金额：
$ 0.77万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、性染色体をもちXY型の性決定を行うナデシコ科の雌雄異株植物メランドリウム(Silene latifolia)を材料に用いて、雄性生殖器官特異的に発現する遺伝子と雄ゲノム特異的なY染色体との関連について解析を行っている。今年度の成果は以下の通り。1.ディファレンシャルスクリーニングにより単離した4種類の雄性生殖器官特異的(Male Reproductive Organ Specific)遺伝子(MROS1-4)のうち、MROS3のゲノミッククローンをinverse-PCRを用いて単離した。約4kbpと3kbpの2種類のクローンが得られた(MROS3AおよびMROS3Bと命名)。両者のORF部分は93.3%の高い相同性を示すが、上流域・下流域は有意な相同性を示さない。従来得られていたcDNAに対応するMROS3Aの転写領域中の3非翻訳領域には、162bpの非自律性トランスポゾン様の挿入配列が認められた。単離したゲノミッククローンをブローブとするマルチカラーFISHを行った結果、MROS3AおよびMROS3B遺伝子は常染色体の末端部にマップされ、性染色体上には存在していないことが明らかになった。2.メランドリウム根端分裂組織を材料に用いて染色体標本を作製し、UVレーザービームマイクロダイセクションによりY染色体を直接単離した。回収したY染色体1本(0.5pg)をトボイソメラーゼI処理後DOP-PCRにかけ、鎖長200から300bpのY染色体由来DNA断片を増幅した。増幅されたDNA断片の全体をブローブとしてFISHを行うと、雌のゲノムDNAをブローブの200倍量サブレッサーとして加えてあるにも関わらず、Y染色体特異的なシグナルは検出されず、全ての染色体にシグナルが見られた。このことから、メランドリウムのY染色体はその大部分が他の常染色体やX染色体と共通のDNA配列からなり、特異的な反復配列は蓄積していないと考えられる。また、Y染色体由来DNAのライブラリーからY染色体の末端部分由来である可能性の高いクローンが一つ得られたので、現在解析している。

In this study, sex chromosomes, sex chromosomes, type XY, sex determination, sex determination, sex The following are the results of this year's "results". 1. Do you want to know how to separate the Male Reproductive Organ Specific (MROS1-4) from the male reproductive organs (MROS1-4)? the inverse-PCR is used to isolate the male reproductive organs. About 4kbp 3kbp 2 (named after MROS3A MROS3B). The ORF section "93.3%" shows high homogeneity, and the upper and lower basins show "intentional" homogeneity. In the field of writing, "3 non-flip fields", 162bp "non-autonomous domains", "cDNA" and "MROS3A" have been assigned to the list of candidates. We need to know the results of the FISH test, the end of the autosomal chromosome of the MROS3A gene, the presence of the gene on the sex chromosome, and the presence of the gene on the sex chromosome. two。 The materials of root tip mitotic tissue were isolated directly from the Y chromosome by using the chromosome tag of the UV chromosome. There is one copy of 0.5pg on the Y chromosome (DNA). The length of the DOP-PCR chromosome is 200 years old and the length of the Y chromosome is 200 years old. The length of the DNA fragment is similar to that of the DNA. The whole DNA fragment, the whole FISH, the female, the DNA, the 200-fold, the Y-chromosome, the whole chromosome. Most of them are autosomal, X-chromosome, DNA, anti-chromosome, Y-chromosome, Y-chromosome, Y chromosome, Y chromosome, The origin of the DNA chromosome and the Y chromosome is the origin of the terminal part of the Y chromosome. The possibility is high.