ヒマワリから単離されたミトコンドリア雄性不稔遺伝子の分子生物学的研究

向日葵线粒体雄性不育基因的分子生物学研究

• 批准号: 07760008
• 负责人: 寺地 徹
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Kyoto Sangyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07760008/
• 关键词: ミトコンドリア; 雄性不稔; ヒマワリ; orf522遺伝子

本申請課題では,雄性不稔ヒマワリのミトコンドリアのorf522遺伝子を大腸菌発現ベクターのひとつ、pMAL-p2、を用いて発現させるとその大腸菌が致死になるという、申請者の新しい発見(Nakai et al. 1995)に基づいて、orf522遺伝子コード領域の変異体を作製し、致死作用をもたらすこのタンパク質の機能領域を絞り込むことを最初の目標に掲げた。そのため、この遺伝子のコード領域に存在する各種制限酵素切断部位を利用して種々のサブクローンを作製する実験、ならびにExoIII/Mung bean両ヌクレアーゼを用いて各種欠失変異体を作製する実験をともに実施し、その結果を検討した。また、新たな大腸菌発現ベクター、pGEX、にorf522遺伝子コード領域全体をクローニングし、産物の大腸菌への致死作用を再検討する実験も試みた。しかしながら、オリジナルのpMAL-p2/orf522では大腸菌への致死作用に関して再現性が確認されたものの、上記の実験により作製された各種プラスミドの中には大腸菌に明瞭な致死作用を示すものは無く、当初の目的を達成できていない。そこで急遽、PCRにより欠失変異体を作製することに方針を転換し、本研究費によりPCRプライマーを購入した。実験は継続中であり、この結果は近日中に明らかになる予定である。なお、本研究費で購入した装置によりタンパク質を大量に精製する系でが確立できたので、今後、今回の実験で作製したorf522遺伝子の各種変異体からタンパク質を調製し、抗体を作製する予定である。

In this application, the male does not know how to kill the bacteria in orf522. The bacteria in this application show that the bacteria are lethal and lethal, and the applicant has a new opinion (Nakai et al.) 1995) in the field of basic medicine and orf522, the system is used in the field of medicine, and the lethal effect is in the field of mechanism. in the field of energy, the target is the first step. In the field of industrial production, there are many kinds of restriction enzyme cut-off parts that can be used to make use of different kinds of equipment to make use of different kinds of equipment, and to use all kinds of ExoIII/Mung bean equipment to make use of all kinds of missing materials to make use of all kinds of missing materials. The lethal effect of E. coli, pGEX, orf522 bacteria in the field, and the lethal effect of bacteria were detected in all the fields. The lethal effect of pMAL-p2/orf522 bacteria was confirmed in all kinds of food samples, the lethal effect of the bacteria was not detected, and the original purpose was determined. In this study, we need to know that we are in a hurry, and that we need to know that we are in a hurry, and that we need to know that we are in a hurry, PCR, we are in a hurry, we are in need of information, and we are in this study. We are in this study. We are in a hurry. We are in this study. In recent days, it has been announced that the forecast is due to occur in recent days. In this study, a large number of devices are used to determine the accuracy of the device. In the future, this time around, the orf522 system will be used to determine the accuracy of the device.