コレステロール胆石の石灰化の成因:胆汁中炭酸カルシウム飽和度と析出抑制活性の解析

胆固醇胆结石钙化的原因：胆汁碳酸钙饱和度和沉淀抑制活性分析

• 批准号: 07770355
• 负责人: 阿部井 誠人
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770355/
• 关键词: 胆石; コレステロール; カルシウム; 炭酸カルシウム; カルシウム結合蛋白

炭酸カルシウム(以下、CaCO_3)による「石灰化」を伴ったコレステロール(以下、コ)胆石は、内科的溶解療法に抵抗性となるため、この石灰化の機序の解明は重要であるが、これまで全く不明であった。CaCO_3析出には、胆汁での物理化学的飽和度と胆汁に存在するCaCO_3析出抑制活性の両者が関与すると考えられる。そこで本研究では、コ石の石灰化の成因を探るため、胆汁のCaCO_3飽和度とCaCO_3析出抑制活性に影響する因子を解析した。1)胆汁中のCaCO_3過飽和度の測定とそれに影響する因子の解析各種胆石例、非胆石例の胆嚢胆汁のCa^<++>濃度(Ca^<++>電極)、pH、pCO_2(血液ガス分析)を測定、[CO_3^<-->]濃度とCaCO_3過飽和度を計算により求め、ムチン濃度(Schiff法)を定量した。その結果、石灰化コ石例では、非石灰化コ石例や非胆石例に比し、胆汁のpH、[CO_3^<-->]が有意に高く、CaCO_3飽和度は有意に高く、過飽和状態にあることが判明した。胆汁中CaCO_3飽和度は、胆汁脂質やムチン量とは相関せず、胆汁pH値に依存した。2)胆汁中CaCO_3結晶析出抑制活性に影響する因子の解析胆嚢胆汁試料に対して、a)脂質除去(isopropanol処理)、b)ゲル濾過(Sepharose4Bカラム)、c)ムチン除去(限外濾過)、d)カルシウム結合蛋白の除去(CaCl_2で沈殿)、等の処置を行い、CaCO_3析出抑制活性の由来を探った。その結果、胆汁中CaCO_3析出抑制活性は、胆汁脂質やムチンに依存せず、分子量5kDのカルシウム結合蛋白がその主な源であることが判明した。以上、本研究により、コレステロール胆石の石灰化には1)胆嚢胆汁の酸性化障害(pH上昇)に基づく炭酸カルシウム過飽和胆汁の形成と、2)胆汁中カルシウム結合蛋白(5kD)による炭酸カルシウム析出抑制活性が関与していることが明らかとなった。

CaCO_3 is the most important factor in the mechanism of calcification of gallstones. CaCO_3 precipitation, physical and chemical saturation of bile, existence of bile, and inhibition of CaCO_3 precipitation. In this study, the causes of limestone formation and the factors affecting CaCO_3 saturation and CaCO_3 precipitation inhibition in bile were analyzed. 1)The measurement of CaCO_3 supersaturation in bile and the analysis of factors that affect it were performed. The Ca^&lt;++&gt; concentration (Ca^&lt;++&gt; electrode), pH, and pCO_2(blood gas analysis) of bile from various gallstone and non-gallstone cases were measured, the [CO_3^<-->] concentration and CaCO_3 supersaturation were calculated, and the calcium concentration (Schiff method) was quantified. The results showed that the pH of bile,[CO_3^<-->], CaCO_3 saturation and supersaturation were intentionally high. CaCO_3 saturation in bile is dependent on pH value, lipid content in bile is dependent on pH value. 2)Analysis of factors affecting CaCO_3 precipitation inhibitory activity in bile samples: (a) lipid removal (isopropanol treatment),(b) filtration (Sepharose 4B),(c) removal of calcium from bile samples (external filtration),(d) removal of calcium binding protein (CaCl_2 precipitation), etc. The results showed that the inhibitory activity of CaCO_3 precipitation in bile was dependent on lipid metabolism and the main source of CaCO_3 binding protein with molecular weight of 5kD was identified. In this study, we investigated the relationship between 1) cholelithiasis and calcification, 2) cholelithiasis binding protein (5kD) and cholelithiasis inhibition activity.

项目成果

Abei M: "Inhibitors of calcium carbonate crystallization in human gallbladder bile: relative significance of mucus glycoprotein, calcium binding protein and other possible inhibitors." Gastroenterology. 106. A854 (1994)

阿贝 M：“人胆囊胆汁中碳酸钙结晶的抑制剂：粘液糖蛋白、钙结合蛋白和其他可能的抑制剂的相对意义。”