悪性黒色腫の臓器特異的転移とサイトカイン、特に肺転移とGM-CSF産生との関連

恶性黑色素瘤器官特异性转移与细胞因子尤其是肺转移与GM-CSF产生的关系

• 批准号: 07770655
• 负责人: 山田 宏司
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: 山梨医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770655/
• 关键词: メラノーマ転移; サイトカイン; インターフェロン

当初の研究計画にもとずき、まずヒト由来悪性黒色腫(以下MMと略す)9株のサイトカインのうちGM-CSF,IL-1,IL-6の産生能を調べた。その結果、これらのサイトカイン産生を認めないものが3株、GM-CSFのみ産生するもの2株、IL-1 を産生するもの1株、IL-6を産生するもの2株、IL-1,IL-6ともに産生するもの1株であった。GM-CSFとIL-1または6をともに産生する細胞株はなかった。GM-CSFを産生する2株の細胞のうち1株ではCD-44の発現が細胞膜表面に認められたが、他の1株にはCD-44の発現は認められなかった。またGM-CSFを産生しない細胞株でもCD-44の発現は認められなかった。GM-CSFを産生する2株について、IFN-βがGM-CSF産生に及ぼす影響を調べるため、細胞培養上清中に、IFN-βをそれぞれ、10^2IU/ml,10^3IU/ml,10^4IU/ml加え、3日間培養し、上清中のGM-CSFの濃度を調べたところ、濃度に依存して、GM-CSFの産生が抑制されていた。培養細胞自体の分裂、生存は肉眼的にはコントロール群と差はなく、従ってIFN-βによる直接的な細胞毒性ではなく、GM-CSFの産生のみが選択的に抑制されていると考えられた。さらにGM-CSF産生がmRNAレベルでどうなっているかを調べるため、同様の実験系(IFN-βを加えて培養する系)で、培養した細胞からmRNAを抽出し、RT-PCR法を用いて、GM-CSFのmRNA発現を調べた。mRNAレベルでは、はっきりとした濃度依存的な、抑制は確認できなかった。またヌードマウス尾静脈から培養細胞を接種し、人工的に転移巣を作る系では、GM-CSF産生、CD-44陽性細胞では、肺に転移巣を確認できたが、GM-CSF産生細胞でも、CD-44陰性の細胞は転移巣を形成しなかった。

の original research projects に も と ず き, ま ず ヒ ト origin 悪 sex is black color is swollen (MM と slightly す ") 9 strains の サ イ ト カ イ ン の う ち gm-csf, IL - 1, IL - 6 の could produce を べ た. そ の results, こ れ ら の サ イ ト カ イ ン produce を recognize め な い も の が 3 strains, gm-csf の み produce す る も の 2 strains, IL - 1 を す る も の 1 strains, IL - 6 を produce す る も の 2 strains, IL - 1, IL - 6 と も に produce す る も の 1 strain で あ っ た. GM-CSFとIL-1また に 6をと に に produces a する cell line な な に った. Gm-csf を produce す る 2 strains の cells の う ち 1 strain で は CD - 44 の 発 が membrane surface に now recognize め ら れ た が, 1 strain he の に は CD - 44 の 発 は now recognize め ら れ な か っ た. Youdaoplaceholder0 GM-CSFを produces the <s:1> な を cell line で また CD-44, which shows った recognition められな った った った. Gm-csf を produce す る 2 strains に つ い て, IFN - beta が gm-csf に and ぼ す influence を adjustable べ る た め, に in cell culture supernatant, IFN - beta を そ れ ぞ れ, 10 ^ 2 iu/ml, 10 ^ 3 iu/ml, 10 ^ 4 iu/ml え, 3 day training し, supernatant of の gm-csf の concentration を べ Youdaoplaceholder0 ろ ろ, concentration に dependent on されて て, GM-CSF <s:1> produce が inhibition されて た た た. Cultured cells autograft の split, survival は naked eye に は コ ン ト ロ ー ル group of poor と は な く, 従 っ て IFN - beta に よ る direct な cytotoxicity で は な く, gm-csf の produce の み が sentaku に inhibiting さ れ て い る と exam え ら れ た. さ ら に gm-csf produce が mRNA レ ベ ル で ど う な っ て い る か を adjustable べ る た め, with others in の be 験 system (IFN - beta を え て cultivate す る) で, cultivating し た cells か ら mRNA を out し, rt-pcr method を い て, gm-csf の mRNA 発 now を adjustable べ た. MRNA レ ベ ル で は, は っ き り と し た concentration dependent な, inhibiting は confirm で き な か っ た. ま た ヌ ー ド マ ウ ス caudal vein か ら culture cell を vaccination し, artificial に planning move 巣 を as る department で は and gm-csf, CD - 44 positive cells で は, lung に planning move 巣 を confirm で き た が and gm-csf cells で も, CD - 44 negative の cells は planning move 巣 を form し な か っ た.