脳の性分化決定機構の解析-性中枢領域の神経細胞におけるアロマターゼ遺伝子発現制御機構の解明-

大脑性别分化决定机制分析 - 阐明中枢性区神经元芳香酶基因表达调控机制 -

• 批准号: 07770792
• 负责人: 堂前 純子
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770792/
• 关键词: aromatase; estrogen synthetase; reverse transcriptase-PCR; gonadal steroids; neuronal culture; gene expression

脳内の限られた細胞内でわずかにしか発現していない遺伝子の機能を調べるため、蛍光化プライマーを用いたRT-PCR法によるmRNA微量定量法と、神経細胞の初代培養を組み合わせた実験系を開発した。これを用いてアロマターゼ遺伝子の発現を解析し、以下の成果を得た。1)胎生期の発育に伴うアロマターゼmRNAの増加のin vitroでの再現スライス培養ならびに分散細胞培養の手法を用いて発育の各段階におけるマウス胎児間脳部をin vitroで維持し、アロマターゼmRNAの発現量の経時的な変化を調べた。どちらの培養方法でも、胎生10日(E10)、E11の胎児由来の神経細胞ではアロマターゼmRNA量はほとんど変化しなかった。しかしE12、E13のマウスを用いた場合には、in vivoで見られるのと同様のパターンでアロマターゼmRNAの増加が認められた。これらより胎生期の間脳神経細胞にはin vitroにおいても時間経過に伴うアロマターゼ発現の増加が認められ、これはE12以降の神経細胞自身にプログラムされている可能性の高いことが明らかにされた。2)神経伝達物質によるアロマターゼmRNAの発現調節機構の解析出生前の発育に伴う脳アロマターゼmRNAの増加をもたらす分子機構を解析するため、E13マウス間脳神経細胞を用いて各種薬剤の効果を検討し、多くの神経伝達物質やsecond messengerが発現調節に関わっていることを明らかにした。

A practical system was developed to modulate the function of genes found inside cells, use photochemical primers, RT-PCR methods, and combine primary culture of neurons. The following results were obtained from the analysis of the occurrence of the disease 1)The development of fetal cells is accompanied by the increase of mRNA in vitro, the reproduction of mRNA in vitro and the regulation of mRNA production in vitro. The method of culture is different from that of fetal origin (E10, E11). E12 and E13 are used in combination with each other. The increase in the probability of development of neurons during the prenatal period is due to the increase in the probability of development of neurons during the prenatal period. 2)Analysis of the regulatory mechanism for the expression of mRNA in prenatal development, analysis of the molecular mechanism for the expression of mRNA in prenatal development, analysis of the effects of various agents in the use of E13, and analysis of the regulatory mechanism for the expression of multiple mRNA.