高脂血症による腎糸球体内接着分子発現調節機序の分子生物学的解明

高脂血症肾小球粘附分子表达调控机制的分子生物学阐明

• 批准号: 07770908
• 负责人: 服部 元史
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770908/
• 关键词: 高脂血症; 腎糸球体硬化; 接着分子

本研究の目的は、高脂血症による腎糸球体硬化病変過程のなかで最も重要な段階と考えられるマクロファージ(Mo)の腎糸球体内への浸潤機序を分子生物学的に糸球体内接着分子発現の点から明らかにすることである。主研究者はExHCラット(食餌性高コレステロール血症易発性ラット)を用いた実験で、高脂血症は接着分子発現亢進を介してMoの腎糸球体内への浸潤を誘導することを明らかにしてきたが、本研究では、さらに培養糸球体内皮細胞およびメサンギウム細胞を用いたin vitroの系においても、腎疾患とくにネフローゼ症候群において異常高値を認める脂質成分(とくに酸化LDL)による腎糸球体内接着分子発現亢進(ICAM-1,VCAM-1 mRNA量および蛋白量)を確認した。またmRNA増強は遺伝子転写活性の増加を間接的に示唆するが、Run-on assayにて転写活性化を直接証明した。また高脂血症下においては初期に浸潤してくるMo由来のサイトカインにより接着分子の発現がさらに増強されている可能性があるが、本研究では、IL-1やTNFが酸化LDLによる接着分子遺伝子転写活性化に対して相乗作用があることを確認した。次に、酸化LDLは細胞内の転写調節因子NF-kBを活性化することが知られているため、高脂血症による接着分子発現調節機構について、とくに遺伝子転写調節の点から検討中である。この目的のために、5'上流転写調節領域(NF-kB結合コンセンサス配列を含む)のヒトICAM-1およびVCAM-1DNA断片をルシフェラーゼレポーター遺伝子に組み込み培養糸球体内皮細胞およびメサンギウム細胞に導入(形質転換)し、酸化LDLによるNF-kBを介した転写調節を検討している段階である。ここまでのプロジェクトにより従来知られていなかった酸化LDLによるNF-kBを介しての接着分子発現機序が明らかにされる。

The purpose of this study was to investigate the most important stages of nephrosclerosis in hyperlipidemia, the mechanisms of renal infiltration, and the molecular evolution of subsequent molecules in the kidney. Principal Investigator: ExHC (Predatory Hyperlipidemic Predisposition) Hyperlipidemic and subsequent molecular hyperactivity mediates the induction of renal infiltration in vivo. In this study, cultured human endothelial cells were used in vitro. Kidney disease, kidney disease, kidney disease syndrome, kidney disease, kidney disease syndrome, kidney disease, kidney disease, kidney disease syndrome, kidney disease, kidney The increase in mRNA expression is an indirect indication of increased transcription activity, and is directly demonstrated by Run-on assay transcription activity. In this study, we confirmed the role of IL-1 and TNF in acidifying LDL and in activating subsequent molecular pathways. In addition, acidified LDL activates the intracellular regulatory factor NF-kB, which is known to be involved in hyperlipidemia, and then the regulatory mechanism of molecular development. The aim of this study is to investigate the regulation of ICAM-1 and VCAM-1 DNA fragments in the 5'up-flow regulatory domain (NF-kB binding protein sequence), including the regulation of NF-kB in cultured endothelial cells and in cultured endothelial cells. The NF-kB pathway and subsequent molecular evolution mechanisms are described below.