人血小板におけるADP刺激による細胞内Ca2+濃度上昇に対するPlasminの効果

纤溶酶对 ADP 刺激的人血小板细胞内 Ca2+ 浓度增加的影响

• 批准号: 07770904
• 负责人: 中村 宏二
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770904/
• 关键词: 人血小板; ADP; Plasmin; Calcium; Tyrosine kinase

人血小板を用いて、PlasminとADP(Adenosine diphosphate)の相互作用を検討した。人血小板を1CU/mlのPlasminにて前処置した後に50μMのADPを加えるとADP刺激による細胞内Ca濃度のpeakは、Ca(+)bufferにて150nMから200nMに増強された。刺激剤の投与順序を逆にしても同様の増強作用が認められた。これらの増強作用は、Ca(-)bufferでは減弱しており、Mn entry法にて細胞外Caの流入が増加していた。また、上記と同条件にて血小板凝集能も測定し、PlasminとADPの増強作用が認められた。これらの増強作用は、700μMのGPIIb/IIIa fibrinogen receptor blocker(RGDS peptide)にて減弱された。これらのことより、ADPとPlasminの増強作用は、GPIIb/IIIaを介する細胞内伝達機構が働いていることが示唆された。このreceptorは、fibrinogenを架橋とする血小板凝集に重要な役割を果たしていると考えられた。また、この相乗作用が細胞内Caの流出低下によるものでないことを確かめるために、^<22>Naを用いてNa-K ATPase活性を測定したがpump活性の低下は認められなかった。Tyrosine kinaseとの関連は、現在検討中であるが、Genistein(Tyrosine kinase inhibitor)にて前述の相乗作用が抑制される傾向がみられている。最終的には、Western blot法にて確認する予定である。

Human platelets を are treated with を て and PlasminとADP(Adenosine diphosphate) <s:1> interaction を検 to counteract た. Platelet を 1 cu/ml の Plasmin に て 処 before buy し た に after 50 microns の ADP を plus え る と ADP stimulation に よ る の intracellular Ca concentration peak は, Ca (+) buffer に て 150 nm か ら 200 nm に raised strong さ れ た. The stimulant dose is the same as the sequence of を reverse に て て を を enhancement effect が recognized められた. は こ れ ら の raised strong action, Ca (-) buffer で は abate し て お り, Mn entry に て extracellular Ca の inflows が raised し requirement by て い た. Youdaoplaceholder0, the above と is used to determine the platelet agglutination energy of にて under the same conditions, and the enhancing effect of PlasminとADP <s:1> が is recognized as められた. The <s:1> れら <s:1> enhancement effect にて and the 700μM <s:1> GPIIb/IIIa fibrinogen receptor blocker(RGDS peptide)にて weakening された. こ れ ら の こ と よ り, ADP と Plasmin は の raised strong action, GPIIb/IIIa を interface す る 伝 of institutions in the cell が 働 い て い る こ と が in stopping さ れ た. こ の receptor は, fibrinogen を bridging と す る platelet aggregation に important な "を cut fruit た し て い る と exam え ら れ た. ま た, こ の phase 乗 role が low intracellular Ca の outflow に よ る も の で な い こ と を か indeed め る た め に, ^ < 22 > Na を with い て Na - determination of K ATPase activity を し た が pump low active の は recognize め ら れ な か っ た. Tyrosine kinase と の masato は, now beg in 検 で あ る が, Genistein (Tyrosine kinase inhibitor) に て aforesaid の phase 乗 が restrain さ れ る tendency が み ら れ て い る. The final に に and Western blot にて confirm the する set である.