IL-1R antaqonist発現による胃癌悪性度評価と遺伝子療法への応用

IL-1R拮抗剂表达评价胃癌恶性肿瘤及其在基因治疗中的应用

• 批准号: 07770987
• 负责人: 硲 彰一
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770987/
• 关键词: 胃癌; 胃癌細胞株; sIL-1ra(分泌型); iCIl-1ra(細胞内局在型); RT-PCR; 免疫染色

臨床研究【方法と結果】胃癌38例の癌部、非癌部および胃癌細胞株(KAT O III、MKN-28)におけるsIL-1ra(分泌型)、icIL-1ra(細胞内局在型)mRNAの発現をRT-PCR法を用いて解析した。免疫染色は抗IL-1ra抗体による間接酵素抗体法にて行った。RT-PCR:sIL-1ra mRNAは癌部で20/38(52.6%)、非癌部で7/38(18.4%)に発現しており、癌部での発現率が高かった(P<0.01)。KATOIIIおよびMKN-28ではsIL-1ra mRNAの発現は認めなかった。一方、icIL-1ra mRNAは癌部、非癌部、KATOIII、MKN-28全てに認めた。癌部におけるsIL-1ra mRNAの発現を基準にしてsIL-1ra(+)20例、sIL-1ra(-)18例の2群に分け、各病理学的因子との関連性を検討したところ、sIL-1ra mRNAとリンパ節転移、肝転移との間に正の相関を認めた(P<0.02)。また、リンパ管侵襲および組織学的進行度と正の相関傾向を認めた。免疫染色:sIL-1ra mRNAを発現している胃癌組織では免疫担当細胞にIL-1ra proteinが強く発現していた。【結論】sIL-1ra mRNA発現胃癌症例はリンパ節転移および肝転移を高率に伴っており、胃癌の悪性度を反映する有用な因子であると考えられた。基礎研究【方法と結果】PHA+PWM刺激マウス単核球よりRT-PCR法にてマウスIL-1ra cDNAを作成し,pRC/CMV vectorにHind III-XbaIにて組み込んだ.マウスLLCおよびcolon-26細胞にリポフェクチン法にてIL-1ra遺伝子を導入し、現在転移実験を進行中である.

Clinical study [Methods] mRNA expression of sIL-1ra (secretory type) and icIL-1ra (intracellular localized type) in 38 gastric cancer cell lines (KATOIII, MKN-28) was analyzed by RT-PCR. Immunostaining for IL-1ra antibodies was performed using indirect enzyme antibody method. RT-PCR:sIL-1ra mRNA was detected in 20/38(52.6%) of cancer sites and 7/38(18.4%) of non-cancer sites, and the incidence of sIL-1ra mRNA in cancer sites was significantly higher (P<0.01). KATOIII MKN-28 sIL-1ra mRNA One prescription, icIL-1ra mRNA, cancer, non-cancer, KATOIII, MKN-28 all recognized. sIL-1ra mRNA expression was detected in 20 cases and 18 cases of sIL-1ra (-) in cancer tissues. The correlation between sIL-1ra mRNA expression and pathological factors was analyzed (P<0.02). The degree of progression and positive correlation of histological changes were identified. Immunostaining:sIL-1ra mRNA was found in gastric cancer tissues and IL-1ra protein was strongly found in immune responsible cells. [Conclusion] sIL-1ra mRNA expression in gastric cancer is associated with high frequency of liver metastasis, and it is a useful factor to reflect the degree of gastric cancer. Basic research [Methods and results] PHA+PWM stimulation for IL-1 cDNA generation by RT-PCR,pRC/CMV vector for Hind III-XbaI IL-1ra gene was introduced into colon-26 cells by PCR, and the process of transformation is in progress.