妊婦末梢血中の胎児細胞による出生前遺伝子診断

利用孕妇外周血胎儿细胞进行产前基因诊断

• 批准号: 07771419
• 负责人: 関沢 明彦
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: National Center of Neurology and Psychiatry
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771419/
• 关键词: 出生前診断; 遺伝子診断; 妊婦末梢血; 有核赤血球

胎児遺伝性疾患の出生前診断は主に羊水穿刺、絨毛採取などにより胎児細胞を採取し行われているが、これらの手技が流産の原因となることがある。今回、より安全な胎児遺伝子診断法として、妊婦末梢血中に極少量存在する胎児由来の有核赤血球に注目し、妊婦末梢血中より有核赤血球を回収し、Duchenne型筋ジストロフィー(DMD)などの遺伝性疾患の出生前診断に応用する方法の確立を試みた。胎児細胞の分離は、妊婦8-20週の妊婦より末梢血7mlを採血、Percoll不連続密度勾配遠沈法で有核赤血球を含む分画を分離し、塗沫染色し、顕微鏡下で有核赤血球を同定し、その単一細胞をmicromanipulatorで選択的に分離、DNAを抽出しPrimer extension pre-amplification(PEP)法にて単一細胞に由来するDNA全体を増幅した。そして、そのPEP産物の一部で、ZFX/ZFY遺伝子による性別診断およびDuchenne型筋ジストロフィー(DMD)のジストロフィン遺伝子exon4,8,12,45,48,50,51領域について遺伝子欠失の有無についての診断を可能にした(Neurology,1996;掲載予定)。さらに、胎児のRh式血液型診断についても同様の方法を応用し、診断可能にした(Obstetrics and Gynecology,1996;掲載予定)。この方法は、妊婦末梢血より有核赤血球を回収し、胎児由来である事を性別診断することで証明した後、同時に多種の遺伝子診断を行う事を可能にする方法である。また、本法は妊婦の6週頃からと早期より診断可能なこと、検査自体が母体、胎児双方にとって無侵襲的であることなど利点を有しており、次世代の出生前診断法と考えられる。

Tire where legacy 伝 disorder の は prenatal diagnosis main に amniotic fluid puncture, fluffy take な ど に よ り tire line where cells を take し わ れ て い る が, こ れ ら の manipulation が の cause miscarriage と な る こ と が あ る. Today back, よ り security な tire where posthumous son 伝 diagnostics と し て, very small amounts in the maternal peripheral blood に す る tire where origin の nucleated red blood cell に attention し, maternal peripheral blood よ り nucleated red blood cell を back 収 し, Duchenne muscle ジ ス ト ロ フ ィ ー (DMD) な ど の heritage 伝 disorder の prenatal diagnosis に 応 with す の る method established を try み た. Tire where cell separation の は, maternal 8 to 20 weeks の maternal よ 7 ml を り peripheral blood collection, the density of Percoll not even 続 hook with much shen method で nucleated red blood cell contains を む points draw を separation し, besmear foam dyeing し, 顕 micro microscopically で nucleated red blood cell を with し, そ の 単 a cell を micromanipulator で sentaku を に separation, DNA Extract the total を increase of するDNA of にて単 cells に by the pre-amplification(PEP) method た た. Product そ し て, そ の PEP の a で, ZFX/ZFY but 伝 に よ る gender diagnosis お よ び Duchenne type steel ジ ス ト ロ フ ィ ー (DMD) の ジ ス ト ロ フ ィ ン heritage 伝 exon4, 8,12,45,48,50,51 field に つ い て heritage 伝 lost son owe の whether に つ い て の diagnosis can に を し た (N eurology,1996; (As prescribed). Youdaoplaceholder0, fetal 児 <s:1> Rh type of blood type diagnosis に さらに て て に similar <s:1> method を応 use に, diagnosis may に た た(Obstetrics and Gynecology,1996; as presented). こ の way は, maternal peripheral blood よ り nucleated red blood cell を back 収 し, where origin で あ る matter を gender diagnosis す る こ と で prove し た after, at the same time に の heritage 伝 son diagnosis を doeth う を may に す る method で あ る. ま は た, this law worthy of maternal の 6 weeks か ら と early よ り diagnosis may な こ と, 検 autologous が maternal and fetal where both sides に と っ て without invasion で あ る こ と な ど tartness を have し て お り, next generation の prenatal diagnosis と exam え ら れ る.

项目成果

A.Sekizawa et al.: "Prenatal diagnosis of Duchenne muscnlar dystrophy using a single fetal nucleated erythrocyte in maternal blood" Neurology. (1996)

A.Sekizawa 等人：“使用母体血液中的单个胎儿有核红细胞对杜氏肌营养不良症进行产前诊断”神经病学。