Na-K ATPase 遺伝子内のDNA反復配列の異常増幅と白内障発生との関連

Na-K ATP酶基因DNA重复序列异常扩增与白内障发生的关系

• 批准号: 07771516
• 负责人: 関根 康生
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771516/
• 关键词: 白内障; 水晶体; PCR; くり返し配列; Micro Sutellite DNA; Na-K ATPase; 遺伝的多型; SSCP

白内障発生と水晶体のNa-K ATPaseの活性低下とは深い関係があることが広く知られている。従来はNa-K ATPaseがS-H基を多く持つ膜蛋白であることから、過酸化反応は、free radicalとの関連が取りざたされてきた。近年、遺伝子内のMicro satellite DNAの反復数の異常増加が、晩発性の疾患の原因として注目されてきている。そしてNa-K ATPase geneには三塩基反復(trinucleotide repeat)が多く存在しており、その数の個人的相異が多型として存在する可能性がある。従って、水晶体の変性疾患である白内障において、三塩基反復数の個人的相異や加令による反復数の異常増加が白内障発生の原因として関与している可能性が示唆されたため本研究を施行した。発生原因不明の白内障患者(138名)及び、同地域、同年齢域の白内障非発生者(62名)合計200名を対象とした。対象者の血液によりDNAを抽出し上記の三塩基反復数の個人的相異と白内障発生との相関の解析を行った。方法としてはNa-K ATPase geneのβ subunit(accession No.M25161)のIntron1に含まれる、(CAT)_n=(No.2700-2732)と(GCC)_n=(No.1441-1464)を含む領域の二つを別々にPCRで増幅し、その増幅産物をSSCP法などを用いて増幅産物の塩基数の変異および配列の変異をも検出するべく実験を施行した。しかし、今回の方法では残念ながら(CAT)_nと(GCC)_nを含む二つの領域ともに、PCR産物の総塩基数においてSSCP法でもシークエンスゲルを使用した総塩基数の測定にても、ほぼ全ての検体において個人的相違は認められなかった。今回は全くのnegative dataであり論文発表はできないが、次回はターゲットを他の有効な部分に絞り込み、PCRシークエンス法などの直接測定法を含めた有効な手段を用いて研究を発展させていきたい。

Cataracts are caused by low Na-K ATPase activity in the crystalline lens and a deep relationship between the cataract and the crystal. The Na-K ATPase is a S-H base を multi-layer membrane protein であることから. In recent years, there has been an increasing number of recurring anomalies in the DNA of Micro satellites in human bodies, and the causes of late-life diseases have attracted much attention. The Na-K ATPase gene has three base repeats (trinucleotide repeat), and there are many possibilities.従って、Crystal lens deformity disease であるcataract において、三塩组 Repeated Count のIndividual differences and added orders による Repeat The reason for the abnormal increase in cataract development is related to the possibility of cataract development. This study was carried out. A total of 200 patients were included in the study, including cataract patients (138 patients) with unknown causes and non-cataract patients (62 patients) in the same region and year. The blood and DNA of the target person are extracted, and the three-dimensional base is repeatedly counted. The differences between individuals and the development of cataracts are analyzed and related. Method としてはNa-K ATPase geneのβ subunit(accession No.M25161)のIntron1にれる、(CAT)_n=(No.2700-2732)と(GCC)_n=(No.1441-1464)を included In the field of PCR, the amplification products are used in the SSCP method.てincreased product base number の変different およびmatching sequence の変different をも検出するべく実験をexecutionした.しかし、This chapter's method では zannin ながら(CAT)_nと(GCC)_nをcontaining む二つの区ともに、PCR product の総塩base においてThe SSCP method is used to determine the base number of the sewage treatment system.ても、ほぼ全ての検体においてpersonal conflict はcognitionめられなかった. This time it’s all negative dataでありthesis発表はできないが、下注はターゲットをhisのeffectiveなpart的に竊込み、PC Rシークエンス法などのDirect determination methodをcontainingめたeffectiveなmeansをいて researchを発出させていきたい.