DNA反復配列を持つ酵素における反復数の異常増幅と白内障発生との相関に関する研究

酶重复次数异常扩增与DNA重复序列与白内障发生的相关性研究

• 批准号: 08771463
• 负责人: 関根 康生
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771463/
• 关键词: 白内障; DNA多型; PCR; triplit repeat; Na-K ATPase; カルモジュリン; Ca^<2+>dependent-protain Kinase; PCRダイレクトシークエンス法

近年、遺伝子内micro satellite DNAの繰り返し配列のrepeat数の経年性異常増幅とそのinstabilityが晩発性の疾患の原因として注目されてきている。しかも、repeat数の異常増幅は遺伝性疾患のみならず、変性疾患における罹患組織細胞内遺伝子異常の一つとしても注目されている。calmodulin、Ca^<2+>dependent-protainase、Na-K ATPaseなどは、白内障発生に関して重要な役割を担っていることが知られているが、calmodulin、Ca^<2+>dependent-protainase、Na-K ATPaseのgeneには三塩基反復(trinucleotide repeat)が存在しており、その数の個人的相異が多型として存在する可能性がある。従って、水晶体の変性疾患である白内障において、三塩基反復数の個人的相異や加令による反復数の異常増加が白内障発生の原因として関与している可能性が示唆されたため本研究を実行した。発生原因不明の白内障患者(138名)及び、同地域、同年齢域の白内障非発生者(62名)合計200名と対象とし血液より抽出されたDNAを使用し上記の三塩基反復数の個人的相異と白内障発生との相関の解析を行った。方法としてはNa-K ATPase geneのβ subunit(accession No.M25161)に含まれる、(CAT)n=(No.2700-2732)と(GCC)n=(No.1441-1464)とCalmodulin gene (accession No.A31920)の(GAA)n=(No.318-335)を含む領域を別々にPCRで増幅し、前年度は増幅産物をSSCP法を主に用いて増幅産物の塩基数の変異および配列の変異をも検出するべく実験を施行したが、今回はDNAオートシークエンサーを使用しPCRダイレクトシークエンス法で直接塩基配列を決定していった。しかし、今回の方法でも残念ながら(CAT)n、(GCC)n、と(GAA)nを含む三つの領域においては、PCR-SSCP法でもダイレクトシークエンス法でも全ての検体において個人的相違は認められなかった。今回も残念ながら全くのnegative dataであり論文発表はできなかった。

In recent years, the annual abnormal increase in the number of repeats of the microsatellite DNA in 伝 cells, とそ instabilityが, and late-onset sexual disorders have been noted. The causes are と て, されて, されて, て, and る. し か も, repeat number の exceptions raised picture は heritage 伝 disorder の み な ら ず, - disorder に お け る cancer cells within the heritage 伝 child abnormal の a つ と し て も attention さ れ て い る. calmodulin, Ca^<2+>dependent protainase, Na-K ATPase な ど は, cataract 発 に masato し cut を bear っ て important な service て い る こ と が know ら れ て い る が, calmodulin, Ca ^ 2 + > < dependent - protainase, Na - K ATPase の gene に は three salt base repeatedly (trinucleotide repeat)が there exists the possibility that there is a てお てお てお and a そ number of が polymorphisms of individuals と and て there is a する possibility がある. 従 っ て, crystalline の - disorder で あ る cataract に お い て, three salt base repeatedly Numbers is の individual otherness や make に よ る Numbers is の abnormal raised repeatedly が cataract 発 raw の reason と し て masato and し て い が る possibility in stopping さ れ た た め を this research line be し た. 発 raw unexplained の cataract patients (138) and び, with non 発 the living region, in the same year 齢 domain の cataract (62) total 200 と like と seaborne し blood よ り spare さ れ た DNA を use し written の three salt base number of repeated の individual otherness と cataract 発 raw と の phase masato の parsing line を っ た. Method: と て て Na-K ATPase gene <s:1> β subunit(accession No.M25161)に containing まれる, (CAT)n=(No.2700-2732)と(GCC)n=(No.1441-1464)とCalmodulin gene (accession No. の A31920) (the GAA) n = (No. 318-335) contains を む field を don't 々 に PCR で portrait rights し, former annual は raised product を を main に SSCP method with い て raised product picture の salt base の - different お よ び match column の - different を も 検 out す る べ く be 験 を imposed し た が, today back to は DNA オ ー ト シ ー ク エ ン サ ー を Using し PCR ダ イ レ ク ト シ ー ク エ ン で ス method directly salt base with column を decided し て い っ た. し か し, today back to の way で も remnants read aloud な が ら (CAT) n, n (GCC), と (the GAA) n を containing three つ む の field に お い て は, PCR - SSCP method で も ダ イ レ ク ト シ ー ク エ ン ス method で も full て の 検 body に お い て personal は deemed to recognize め ら れ な か っ た. This time, the thesis is published in the form of ながら full く <s:1> negative dataであ and った.

项目成果

関根康生: "眼科医のインターネット体験-第7話-TelnetとMact・UNIXも怖くない。" あたらしい・眼科. 13巻7号. 1071-1075 (1996)

Yasuo Sekine：“眼科医生的互联网体验 - 第 7 集 - Telnet、Mact 和 UNIX 并不可怕。”《新眼科》第 13 卷，第 7 期（1996 年）。