神経細胞の分化と分裂停止の分子機構-テロメア(染色体末端小粒)短縮現象に着目して

神经元分化和分裂停滞的分子机制——关注端粒（染色体末端的小颗粒）的缩短现象

• 批准号: 07857017
• 负责人: 小堀 信秀
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07857017/
• 关键词: telomere; progenitor cell; neuron; astrocyte; FISH; Northern blotting

本課題では、神経細胞および神経膠細胞の増殖、分化とテロメア短縮現象の相関について、FISH(fluorescence in situ hybridization)法およびサザンブロット法を用いて研究した。最初に、ヒトおよびラットのリンパ球染色体標本を作製し、用いたプローブ(Van der Ploegより供与された)が分裂中期染色体のテロメアを正確に認識することを確認した。次に、ラット胎児(妊娠13,15,17,19,21日目)および成熟、老齢ラットの脳組織切片上でFISH法を行った。胎児脳における分裂増殖帯の神経系幹細胞と新生児大脳皮質の分化した神経細胞における、細胞一個あたりのテロメアの個数および染色強度には差異を認めなかった。また成熟、老齢ラットの大脳皮質における染色では、星状神経膠細胞の方が神経細胞より強い染色強度を示したが、染色像に年齢による変化は認められなかった。そこで、サザンブロット法によってテロメアの差異を検討した。ラット胎児脳より神経系幹細胞の培養および分化した神経細胞の培養を、また新生児ラットの大脳皮質より星状神経膠細胞の培養を行い、それぞれのDNAを抽出し、テロメア配列を切断しない制限酵素で処理した。サザンブロット法によって最長のテロメアの長さを比較したところ、神経系幹細胞は約33.5k bp、神経細胞は約31.5k bp、星状神経膠細胞は約34.5k bpであった。この結果より、神経系幹細胞から神経細胞に分化して増殖を停止する過程においてテロメアの短縮が認められるが、星状神経膠細胞に分化した細胞ではテロメアがむしろ延長していることがわかった。本研究結果より、神経細胞と関係膠細胞は同じ起源を持つにも関わらず、神経細胞にはテロメアを延長させる活発な機構がなく、星状神経膠細胞には何らかの機構が存在する可能性が示唆された。

This topic is related to the proliferation and differentiation of Shenxiang cells and the shortening phenomenon of Shenxian cells, and FISH (fluorescence in situ). Hybridization) method is used to study the method of hybridization. Initially, the ヒトおよびラットのリンパspherical chromosome specimen was made, using いたプローブ(Van der Ploegより与された)がMetaphase chromosomesのテロメアをcorrect recognitionすることをconfirmationした. The FISH method was performed on the tissue sections of the mature and mature fetuses (13th, 15th, 17th, 19th and 21st day of pregnancy) of the second and third trimesters. The division and proliferation of embryonic stem cells and the differentiation of new-born embryonic stem cells into the cortex of the nervous system.おける、The number of cells is determined by the difference in staining intensity.また Mature, old 齢ラットの大脳cortex における staining では, stellate glucoblasts の方が神経The staining intensity of the cells is high and the staining intensity is high, and the staining pattern is the same as the staining intensity.そこで、サザンブロット法によってテロメアの difference を検した.ラット fetal stem cell culture および differentiation した神経 cell culture を, またnew life ぐラットの大脳cortical よりThe culture of stellate glial cells is carried out, the DNA is extracted, and the DNA is cut and treated with restriction enzymes.サザンブロット法によって longest のテロメアの长さをComparison したところ, 神経LINE stem cell はapproximately 33.5k bp, 神経ocyte はapproximately 31.5k bp bp, stellate glial cells, approximately 34.5k bp.このRESULTS より、神猌 Lineage Stem Cells から神猌 Cells にDifferentiation してProliferation を Stop する Process にお いてテロメアの Shortening がRecognize められるが, stellate glial cells に differentiated した cells ではテロメアがむしろ extend していることがわかった. The results of this study indicate that the origin of the relationship between glial cells and the relationship between glial cells is the same as the origin of the relationship between glial cells and the relationship between glial cells and glial cells. The extension of the active body and the existence of the stellate celestial body are possible.