肝細胞癌の増殖におけるinterferon regulatory factorの関与

Interferon (IFN)の転写制御因子として作用するintreferon regulatory factor (IRF)-1は、癌抑制遺伝子としても作用することが明らかとなっている。またIRF-1はウイルス感染等のみならず、IFN添加によってもその転写が増加することが判明している。IFNの細胞増殖抑制は、IRF-1を介して発現されると考えられる。培養肝癌細胞株HCC-M, HCC-T, PLC/PRF/5およびChang肝細胞にIFN-αを100、1000、10000IU/mlの濃度で添加し、その細胞増殖に与える結果をmodified,MTT assayにて検討したところ、1000、10000IU/mlの濃度ですはすべての細胞に増殖抑制効果が認められたが、1001U/mlではPLC/PRF/5は増殖が抑制されずむしろ増殖を促進する傾向が見られた。各種肝癌細胞株よりgenomic DNAを抽出し、制限酵素処理後、Southern blot法を用いて検討したところ、PLC/PRF/5のみでrearrangementが認められた。さらに、100IU/ml IFN添加前後でIRF-1の変化を検討するためにmessenger RNAを抽出し、reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR)法を行ったところ、PLC/PRF/5ではIFN添加後に明らかなIRF-1の転写の増加を認めなかった。以上より、IFNの細胞増殖抑制作用は、肝癌細胞株においてもIRF-1を介して発揮されることが示唆されたが、IRF-1遺伝子に異常を認める細胞ではIFNは細胞増殖抑制が解除されていることが考えられた。

Interferon (IFN)の転写制御因子として作用するintreferon regulatory factor (IRF)-1は、癌抑制遺伝子としても作用することが明らかとなっている。またIRF-1はウイルス感染等のみならず、IFN添加によってもその転写が増加することが判明している。IFNの細胞増殖抑制は、IRF-1を介して発現されると考えられる。培養肝癌細胞株HCC-M, HCC-T, PLC/PRF/5およびChang肝細胞にIFN-αを100、1000、10000IU/mlの濃度で添加し、その細胞増殖に与える結果をmodified,MTT assayにて検討したところ、1000、10000IU/mlの濃度ですはすべての細胞に増殖抑制効果が認められたが、1001U/mlではPLC/PRF/5は増殖が抑制されずむしろ増殖を促進する傾向が見られた。各種肝癌細胞株よりgenomic DNAを抽出し、制限酵素処理後、Southern blot法を用いて検討したところ、PLC/PRF/5のみでrearrangementが認められた。さらに、100IU/ml IFN添加前後でIRF-1の変化を検討するためにmessenger RNAを抽出し、reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR)法を行ったところ、PLC/PRF/5ではIFN添加後に明らかなIRF-1の転写の増加を認めなかった。以上より、IFNの細胞増殖抑制作用は、肝癌細胞株においてもIRF-1を介して発揮されることが示唆されたが、IRF-1遺伝子に異常を認める細胞ではIFNは細胞増殖抑制が解除されていることが考えられた。