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アデノウイルスを用いた血管壁に対するナトリウム利尿ペプチド系遺伝子導入

使用腺病毒将利钠肽基因转移至血管壁

基本信息

批准号：
08671361
负责人：
池田義
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

C型ナトリウム利尿ペプチド(CNP)発現非増殖性アデノウイルスを作製し、血管平滑筋細胞に対する増殖抑制効果をβ-ガラクトシダーゼ発現ウイルスを感染させた対照群と比較した。CNP発現ウイルスを感染させた培養血管平滑筋細胞におけるCNP産生は培養血管内皮細胞の約4000倍であったのに対し、対照群ではCNP産生は認められなかった。これに伴ってCNP発現ウイルス感染群ではcyclic GMP産生も著明に増加し、対照群に比し34%の増殖抑制効果が認められた。次に子牛血清にて増殖を刺激した培養血管平滑筋細胞にこれらのウイルスを感染さ、flow cytometryによる検討を行った。対照群では35%の細胞が細胞周期のG2/M+S期にあったのに対し、CNP発現ウイルス感染群では14%の細胞がG2/M+S期であり、過剰発現したCNPは血管平滑筋細胞の増殖を細胞周期のG1期で停止させることが示唆された。これらの細胞におけるcyclinの遺伝子発現をRT-PCR法で検討すると、CNP発現ウイルス感染群では対照群に比し、cyclin Aの発現が遅れて認められ、これがCNPによる細胞周期制御の機序の一つであることが示唆された。次にin vivoにおいて、バルーン傷害後のウサギ大腿動脈にこれらのウイルスを感染させ、2週間後の血管の組織像を見ると、対照群では内膜中膜面積比が0.81であったのに対し、CNP感染群では0.38%と53%の新生内膜増殖抑制効果が認められた。このことから増殖性血管病変に対し、血管壁局所におけるCNPの過剰発現はin vivoにおいても血管平滑筋細胞増殖抑制に働くことが明らかになった。以上のことからCNPはオートクリン、パラクリン因子として将来的に増殖性血管病変に対する遺伝子治療の手段として利用可能であると考えられた。

Type C was infected with diuresis (CNP), and the smooth tendons of blood vessels were not infected. The cells of the smooth tendons of the blood vessels were inhibited. CNP showed that the vascular smooth muscle cells were infected, the vascular smooth muscle cells were cultured, and the vascular endothelial cells were cultured by CNP, which was about 4000 times higher than that of CNP cells. The infection group was infected with CNP, and the colonization inhibition of cyclic GMP population was 34% higher than that of the control group. Sub-fetal bovine serum colonization stimulation, culture of vascular smooth muscle cells, vascular smooth muscle cells, infection and flow cytometry infection. According to the group of 35%, the cell cycle cycle of G2xM + S phase, the infection group of 14% of the infected cells, the cell cycle cycle of G1 phase of CNP smooth muscle cells and the cell cycle cycle of G1 phase were detected by CNP. The results showed that the RT-PCR method was used to detect the infection rate of the cyclin virus, the infection group was detected by the RT-PCR method, the infection group was detected by the CNP method, the infection group was detected by the cyclin A test, the cell cycle was controlled by the cell cycle regulator by the CNP virus, and the cell cycle was controlled by the cell cycle regulator. After secondary in vivo infection and secondary infection, the thigh was infected, the vascular tissue was seen after 2 years, the intima-medial surface of the intima was 0.81, and the neointimal colonization inhibition of CNP infection was 0.38% and 53%, respectively. In the diagnosis of reproductive vascular disease, the CNP of the blood vessel wall showed that in vivo was detected and the proliferation of vascular smooth tendons was inhibited. The above information is related to CNP, factors, and future reproductive vascular disease in the future.