オルニチンおよびポリアミンによる網膜色素上皮細胞傷害の機序解明

阐明鸟氨酸和多胺引起视网膜色素上皮细胞损伤的机制

• 批准号: 08672042
• 负责人: 西村 哲哉
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08672042/
• 关键词: オルニチン網膜症; in vitro; スペルミン

[目的]オルニチン網膜症の発症機序の解明を,in vitroにおいて試みた。[方法]牛網膜色素上皮細胞(RPE)を、オルニチン或いはその代謝物存在下に培養し、[3H]サイミジン取り込みを測定することによって、それらの細胞増殖能に与える影響を調べた。対照として同様の実験を大動脈血管内皮細胞(AEC)についても行った。また、3-(4,5-climethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide(以下MTT)formazanの呈色反応を用いて、細胞死の指標とした。更に蛍光物質であるdansyl基をスペルミンに結合させたdansylspermineを用いて、細胞内におけるスペルミンの局所を経時的に共焦点蛍光顕微鏡を用いて観察した。[結果]Ornithine decarboxyaseの代謝物であるスペルミンに、強い細胞増殖抑制効果がみられた。このスペルミンの細胞増殖抑制効果は、AECには認められずRPEに選択的であった。一方、オルニチンやその代謝物では、細胞増殖抑制効果は明瞭ではなかった。スペルミンの作用は、細胞増殖抑制が細胞死に先行していた。更にスペルミンを、一定時間作用させた後洗浄除去しても、細胞増殖抑制が認められた。又、培地中に加えたdansylspermineが、経時的に細胞質から核へと移行することが共焦点蛍光顕微鏡下に観察された。[結論]in vitroにおいて、オルニチンそのものではなく、その代謝物であるスペルミンに強いRPE増殖抑制効果がみられた。この効果は、RPEに選択的であった。スペルミンのRPE殖抑制効果は、スペルミンが細胞内に取り込まれて発現すると考えられ、その作用点が核である可能性が示唆された。

[Objective] To clarify the pathogenesis of retinal syndrome in vitro. [Methods] Bovine retinal pigment epithelial cells (RPE) were cultured in the presence of metabolites,[3H] and [3H]. The vascular endothelial cells (AEC) in the aorta are closely related to the vascular endothelial cells. 3-(4,5-climethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide(hereinafter MTT)formazan is used as a color reaction indicator and a cell death indicator. In addition, the use of dansyl groups in the synthesis of dansyl spermine in cells and in the synthesis of dansyl groups in cells can be observed by confocal microscopy. [Results] Metabolite of Ornithine decarboxylase was found to inhibit cell proliferation. The cell proliferation inhibition effect of this kind of disease is that the AEC has no effect on the RPE. A prescription, a drug, a metabolite, a cell growth inhibitor, a drug, a drug Cell growth inhibition and cell death are the first steps in cell growth inhibition. In addition, after a certain period of time, the cells were washed and removed, and the growth inhibition was recognized. In addition, in the culture, the cytoplasm of dansylspermine is transferred to the nucleus, which is observed under the confocal microscope. [Conclusion]In vitro, RPE growth inhibition was strongly inhibited by metabolites. This is the first time I've ever seen a woman. The effect of RPE on cell proliferation is shown by the possibility that the cell is isolated from the nucleus and the site of action is isolated from the nucleus.