膜内骨化及び軟骨内骨化に伴う血管新生過程に関する研究

膜内骨化和软骨内骨化相关血管生成过程的研究

• 批准号: 08672065
• 负责人: 笹野 泰之
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08672065/
• 关键词: 膜内骨化; 軟骨内骨化; 血管; ラット; 石灰化; I型コラーゲン; オステオカルシン; プロテオグリカン

目的:軟膜内骨化の過程において、血管の侵入あるいは新生が骨形成にどのように関与するのかについて検討することを目的とした。この際ラット下顎骨の膜内骨化を観察の対象とし、脛骨における軟骨内骨化の過程と比較検討した。方法:胎生14、15、16、17、18、19、及び20日齢のWistar系ラットを用いた。妊娠ラットから子宮を摘出後、胎児の頭部及び下肢を切断して4%パラホルムアルデヒドにて固定しパラフィン包埋試料または凍結試料を作製した。連続切片をつくり、隣接の切片を以下の方法で検討した。(1)血管基底膜の標識:ラミニン及びIV型コラーゲンに対する免疫組織学。(2)間葉細胞の集合に関連する細胞外基質の標識:フィブロネクチンに対する免疫組織学。(3)骨基質タンパクの標識:I型コラーゲン及びオステオカルシンに対する免疫組織学。(4)骨基質プロテオグリカンの標識:アルシアンブルー染色。(5)石灰化の検索:von Kossa染色。結果:下顎では胎生15日に骨形成部位に対応して間葉細胞の集合が見られ、フィブロネクチンに対する免疫反応が認められた。またI型コラーゲンとプロテオグリカンを含う未熟な骨基質が形成されていたが、この基質内には血管は観察されなかった。胎生16日では骨基質にオステオカルシンに対する免疫反応と石灰化が見られ、また基質内へは血管に侵入していた。胎生17日以降ではオステルカルシンの免疫反応性と石灰化がさらに増し、骨基質内には多くの血管を認めた。一方、脛骨における骨基質の形成は胎生17日に始まり、胎生18日以降では下顎骨と同様に骨基質の成熟と石灰化の進行に伴い基質内への血管の侵入が見られた。考察:膜内骨化と軟骨内骨化の両方の骨形成過程において、血管は初期の未熟な骨基質の形成には直接は関与せず、その後の骨基質の成熟と石灰化の進行に重要な役割を演じると考えられる。

Objective: To investigate the process of intrapial ossification, vascular invasion and bone formation. A comparative study of the process of intrathecal ossification in tibia and mandible Methods: The Wistar system was used at 14, 15, 16, 17, 18, 19, and 20 days after birth. After the uterus is removed, the head and lower limbs of the fetus are cut off and fixed. The frozen sample is prepared. The following methods are used to detect the connection between slices and adjacent slices. (1)Identification of vascular basement membrane: Immunohistology of type IV and type IV blood vessels (2)Identification of extracellular matrix associated with mesenchymal cell aggregation: immunohistology. (3)Identification of bone matrix: Immunohistology of type I and type II tumors (4)Bone matrix logo: Ariel Staining. (5)Calcification:von Kossa staining. Results: On the 15th day after birth, the mesenchymal cells were collected and the immune response was recognized. The type I cells were formed in the immature bone matrix, and the blood vessels were observed in the matrix. On the 16th day of birth, the bone matrix was calcareous and the blood vessels were invaded. The immune response and calcification of the fetus after 17 days of birth increased, and the blood vessels in the bone matrix were recognized. The formation of bone matrix in the tibia and tibia began on the 17th day of birth, and the mandible began on the 18th day of birth. The maturation and calcification of bone matrix were accompanied by the invasion of blood vessels in the matrix. To investigate the process of bone formation of intramembranous ossification and endochondral ossification, the formation of immature bone matrix in the early stage of vascular ossification, the maturation and calcification of bone matrix in the later stage, and the important process of bone formation.

项目成果

Y. Sasano et al.: "BMPs induce endochondral Ossification in rats when implanted ectopically within a carrier made of fibrous glass membrane." Anat Rec.(in press). (1997)

Y. Sasano 等人：“当 BMP 异位植入由纤维玻璃膜制成的载体内时，会诱导大鼠软骨内骨化。”

鎌倉慎治,笹野泰之,他: "燐酸オクタカルシウム(OCP)・ヒドロキシアパタイト(HA)混合体を用いた歯槽堤増大に関する実験的研究" 日本口腔外科学会雑誌. 42. 1043-1047 (1996)

Shinji Kamakura、Yasuyuki Sasano 等人：“使用磷酸八钙 (OCP) 和羟基磷灰石 (HA) 混合物进行牙槽嵴增强的实验研究”日本口腔颌面外科学会杂志 42. 1043-1047 (1996)。 ）

M. Kagayama, Y. Sasano, et al.: "An improved mounting method for observation of thick speciments using confocal microscopy." Biotechic & Histochem. 71. 231-233 (1996)

M. Kagayama、Y. Sasano 等人：“一种使用共焦显微镜观察厚样本的改进安装方法。”

Y. Sasano et al.: "Chondrocytes synthesize type I collagen and accumulate the protein in the matrix during development of rat tibial articular cartilage." Anat Embryol. 194. 247-252 (1996)

Y. Sasano 等人：“软骨细胞合成 I 型胶原蛋白，并在大鼠胫骨关节软骨发育过程中在基质中积累蛋白质。”

M. Kagayama, Y. Sasano et al.: "Localization of glycosaminoglycans in periodontal ligament during physiological and experimental tooth movement." J Periodont Res. 31. 229-234 (1996)

M. Kagayama、Y. Sasano 等人：“生理和实验性牙齿移动过程中糖胺聚糖在牙周膜中的定位。”