白血病細胞における転写因子GATA-2の転写調節機構の解析

白血病细胞转录因子GATA-2转录调控机制分析

• 批准号: 10153206
• 负责人: 林 典夫
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10153206/
• 关键词: GATA-2; 転写因子; 造血細胞特異的エンハンサー; 選択的プロモーター; 白血病細胞; 転写調節; 遺伝子導入マウス

転写因子GATA-2は血液細胞の発生・分化に関与し、特に、造血幹細胞や前駆細胞の増殖、自己複製には本因子の発現が必要で、その発現持続と白血病化との関連性が示唆されている。本研究では、GATA-2遺伝子が2つの選択的プロモーターによって制御されている、即ち、近位のIGプロモーターが殆ど全てのGATA-2発現細胞で働いているのに対し、遠位のISプロモーターの活性は造血組織だけに選択的に検出されるというこれまでの成果の上に立って、本遺伝子の転写調節機構、特にISプロモーター/エキソン領域について解析を行った。1)昨年に引続き遺伝子導入マウスを用いた造血組織における調節特性の検討をおこなった結果、IS第1エキソンの5'端に隣接する6 kbpの配列を導入遺伝子に含めると、β-ガラクトシダーゼあるいはGFPレポーター遺伝子が大動脈傍臓側板、AGM領域および神経組織で発現することが確認された。2)in situハイブリダイゼーション解析によれば、これらの組織の内因性GAIA-2の発現状況をレポーター遺伝子の発現が特異的に再現していた。3)AGM領域および胎児肝のGFP発現陽性細胞にはflk-1、c-kitおよびCD45抗原が同定され、GATA-2は未熟造血細胞で発現されていることが示された。4)6 kbp ISプロモター配列の5'側3.5kbpの領域はデオキシヌクレアーゼ高感受性部位の一つを含み、この領域を欠失させると、造血細胞における発現が全く消失した。以上により、発生初期に機能するGATA-2遺伝子の造血細胞特異的エンハンサーが、ISエキソンの5'側2.5kbp〜6.0kbpの範囲に存在することが実証された。なお、白血病細胞株UT-7およびM-TATでもISエキソンが実際に転写されていることが確認されたが、サイトカインの影響についてはさらに検討が必要である。

GATA-2 plays an important role in the development and differentiation of blood cells, especially in hematopoietic stem cells, proliferation and self-replication of progenitor cells, and is essential for the development and maintenance of this factor and leukemogenesis. In this study, GATA-2 gene expression in 2 selected cells was controlled by the regulation mechanism, i.e., the regulation mechanism, and the analysis of the regulation mechanism of GATA-2 gene expression in 2 selected cells. 1)Last year, we investigated the regulatory characteristics of hematopoietic tissue in the introduction of gene, and confirmed that the 6 kbp alignment of the 5'-terminal of the IS 1st gene contains GFP gene, side plate of the artery, AGM domain and development of the nervous tissue. 2)In situ analysis of GAIA-2 in tissues, the occurrence of GAIA-2 in tissues and the occurrence of GAIA-2 in tissues are characterized by specific reproduction. 3)AGM domain and GFP positive cells in fetal liver were identified by flk-1, c-kit and CD45 antigens, and GATA-2 immature hematopoietic cells were identified by GFP positive cells. 4)6 The 3.5kbp domain of the 5'side of the kbp IS is not included in the high sensitivity site, and the domain is missing. The hematopoietic cells appear and disappear completely. The presence of a 2.5kbp ~ 6.0kbp region on the 5'side of the GATA-2 gene, which IS specific to hematopoietic cells, has been demonstrated in the above cases. The leukemia cell line UT-7 and M-TAT were tested for the presence of ISC in vitro and confirmed for the presence of ISC.

项目成果

Muto,Akihiko: "Identification of Bach2 as a B-cell-specific partner for small Maf proteins that negatively regulate the immunoglobulin heavy chain gene 3'enhancer." EMBO J.17. 5734-5743 (1998)

Muto, Akihiko：“鉴定 Bach2 作为小 Maf 蛋白的 B 细胞特异性伴侣，对免疫球蛋白重链基因 3 增强子进行负调节。”

Kobayashi,Akira: "Molecular cloning and functional characterization of a new CNCfamily transcription factor Nrf3." J.Biol.Chem.274. 6443-6452 (1999)

Kobayashi, Akira：“新型 CNC 家族转录因子 Nrf3 的分子克隆和功能表征。”